重癥肌無力臨床嚴重程度與神經(jīng)電生理特點之間的關(guān)系及雷帕霉素治療實驗性自身免疫性重癥肌無力的研究.pdf

1、第一部分:重癥肌無力臨床嚴重程度與神經(jīng)電生理特點之間的關(guān)系
　　目的：
　　獲得性重癥肌無力(acquired myasthenia gravis, MG)是一種典型的由抗體介導的自身免疫性疾病,病變主要累及神經(jīng)肌肉接頭。電生理檢查是診斷 MG的重要技術(shù)方法,其中最常用的是重復(fù)神經(jīng)刺激(repetitive nerve stimulation, RNS)。多數(shù)研究僅將RNS作為一種診斷方法,而較少關(guān)注復(fù)合肌肉動作電位(com

2、pound muscle action potential, CMAP)波幅降低程度的意義。對MG患者行針電極肌電圖(needle electrode electromyography, NEMG)檢查有助于明確診斷,部分MG患者可出現(xiàn)肌源性受損表現(xiàn),但少有研究分析解釋這一現(xiàn)象的臨床意義。本研究詳細分析低頻RNS檢查CMAP波幅降低程度和NEMG肌源性受損與臨床嚴重程度之間的關(guān)系,以進一步探求電生理檢查結(jié)果對于MG的臨床意義。
　

3、　材料與方法：
　　選取2012年1月至2013年5月期間在解放軍總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的77例 MG患者為研究對象。詳細記錄患者基本信息。根據(jù)患者病情采用美國重癥肌無力協(xié)會(myasthenia gravis foundation of America, MGFA)臨床分型。對入組患者進行規(guī)范的量化MG評分(quantified myasthenia gravis scoring system, QMG)和MG日常活動評分(MG

4、 activities of daily living, MG-ADL),用上述指標反映臨床嚴重程度。在我院肌電圖室對入組患者進行面神經(jīng)、副神經(jīng)、腋神經(jīng)和尺神經(jīng)的低頻RNS檢查,并對所有患者進行常規(guī)NEMG檢查。統(tǒng)計分析RNS檢查CMAP波幅降低程度與臨床嚴重程度之間的關(guān)系。分析NEMG正常組與肌源性受損組之間臨床特點之間的差異。
　　結(jié)果：
　　入組77例均為明確診斷的MG患者,入組患者進行低頻RNS檢查CMAP波幅降低程

5、度均達診斷標準,RNS檢查結(jié)果皆為陽性。CMAP波幅降低程度與QMG和MG-ADL評分之間均有良好的相關(guān)性。刺激面神經(jīng)在眼輪匝肌記錄時CMAP波幅降低程度與QMG評分相關(guān)性分析結(jié)果r=0.506, P<0.001,MG-ADL相關(guān)性分析結(jié)果r=0.445, P<0.001;刺激副神經(jīng)在斜方肌記錄時CMAP波幅降低程度與QMG評分相關(guān)性分析結(jié)果r=0.426, P=0.019,MG-ADL相關(guān)性分析結(jié)果r=0.399, P=0.029;刺

6、激腋神經(jīng)在三角肌記錄時CMAP波幅降低程度與QMG評分相關(guān)性分析結(jié)果r=0.507, P<0.001,MG-ADL相關(guān)性分析結(jié)果r=0.371, P=0.008;刺激尺神經(jīng)在小指展肌記錄時 CMAP波幅降低程度與 QMG評分相關(guān)性分析結(jié)果 r=0.340, P=0.018,MG-ADL相關(guān)性分析結(jié)果r=0.364, P=0.011。結(jié)果提示這種相關(guān)性在近端肌肉記錄較遠端肌肉記錄明顯。22例(28.6％)NEMG出現(xiàn)運動單位電位時限縮短、

7、波幅降低,但均無異常自發(fā)電位及異常募集相,NEMG結(jié)果提示肌源性受損。肌源性受損組QMG(P<0.01)和MG-ADL(P<0.01)評分均顯著高于正常NEMG組。肌源性受損組MGFA分型以Ⅲ型和Ⅳ型為主,正常NEMG組以I型和II型為主,兩組間MGFA分型差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。而兩組在性別、發(fā)病年齡、病程、起病部位及胸腺類型之間的差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　MG患者低頻RNS檢查CMA

8、P波幅降低程度與MG患者的臨床嚴重程度有一定的相關(guān)性,這種相關(guān)性在近端肌肉記錄時更明顯。CMAP波幅降低程度在一定程度上可反映MG臨床嚴重性。部分MG患者NEMG檢查可出現(xiàn)肌源性受損表現(xiàn)。出現(xiàn)肌源性受損的患者病情較正常NEMG者更重。NEMG結(jié)果與年齡、性別、病程、起病部位、胸腺類型無關(guān)。神經(jīng)電生理檢查不僅僅是診斷 MG的重要技術(shù),其在一定程度上可提示病情的嚴重程度。
　　第二部分:雷帕霉素治療實驗性自身免疫性重癥肌無力的研究

9、r>　　目的：
　　雷帕霉素(rapamycin, RAPA)是一種新型大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑,其通過與雷帕霉素靶蛋白結(jié)合發(fā)揮生物學效應(yīng)。MG是一種自身免疫性疾病,免疫抑制劑已被廣泛應(yīng)用于該病的治療。目前尚無使用RAPA治療MG的系統(tǒng)性研究。在本研究中我們首次嘗試使用 RAPA對實驗性自身免疫性重癥肌無力( experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG)動物模型進行治療,并初步探索R

10、APA對MG治療的可能機制。
　　材料與方法：
　　使用鼠源性乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor, AChR)α亞單位97-116肽段免疫接種Lewis大鼠誘導建立EAMG動物模型,評估動物模型臨床癥狀,對其進行抗體檢測及電生理檢查,以確定動物模型的成功構(gòu)建。分別使用 RAPA和環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)干預(yù)成功建立的EAMG動物模型,并觀察治療效果。使用流式細胞技術(shù)檢測大

11、鼠外周血 Treg細胞和 Th17細胞的數(shù)量,比較各組間兩類細胞的變化情況。
　　結(jié)果：
　　使用 R97-116肽段免疫接種 Lewis大鼠后漸出現(xiàn)體重下降及無力表現(xiàn),抗AChR抗體陽性,低頻RNS檢查結(jié)果陽性,提示EAMG動物模型建立成功,造模成功率為74.28%。藥物干預(yù)后大鼠局部炎癥及無力癥狀均有好轉(zhuǎn),RAPA組死亡率低于CTX組,體重較CTX組增加。與病例對照組相比RAPA組Treg細胞比例升高、Th17細胞比例減

12、少;CTX組Treg細胞和Th17細胞比例均降低。兩組之間Treg細胞數(shù)量差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。與空白對照組相比 RAPA組 CD4+T細胞數(shù)量無明顯減少,而CTX組則明顯減少,差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　RAPA可有效治療R97-116肽段免疫接種Lewis大鼠誘導的抗AChR抗體陽性EAMG動物模型。與CTX相比,RAPA干預(yù)組病死率低,體重增加,提示RAPA效果優(yōu)于CTX。此外與