直腸癌細(xì)胞新輔助放化療后超微結(jié)構(gòu)的改變及中藥防治急性放射性腸炎的研究.pdf

1、直腸癌因其較高的發(fā)病率和死亡率被認(rèn)為是威脅我國人民健康的第五大殺手，目前根治性手術(shù)仍然是唯一能根治直腸癌的首選治療手段。但臨床實(shí)際中有部分患者就診時已錯過了根治性手術(shù)的機(jī)會，部分患者即使完成了根治性手術(shù)切除，也常常由于腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移而導(dǎo)致治療失敗。因此，直腸癌新輔助放化療的概念逐漸被提出并開始廣泛的應(yīng)用于臨床。新輔助放化療可以縮小腫瘤，減滅已經(jīng)存在的微小轉(zhuǎn)移灶從而達(dá)到術(shù)前降低腫瘤分期、提高根治性手術(shù)切除率、增加低位直腸癌的保肛率及減低

2、術(shù)后局部復(fù)發(fā)率的目的。2012年NCCN直腸癌治療指南明確新輔助放化療作為局部進(jìn)展期直腸癌的治療原則。
　　目前從組織病理學(xué)及分子生物學(xué)角度研究直腸癌細(xì)胞損傷的報(bào)道較多，利用超微結(jié)構(gòu)觀察細(xì)胞損傷的相關(guān)研究則較少。超微結(jié)構(gòu)角度的直腸癌細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化及對直腸癌新輔助放化療的療效評價，對于指導(dǎo)新輔助放化療更好的應(yīng)用于臨床具有一定的意義。另外，不難發(fā)現(xiàn)接受新輔助放化療后達(dá)到病理完全緩解(Pathological complete remis

3、sion，pCR)的病例，對于這類病例的后續(xù)治療方案目前爭議較大。本研究前兩個部分研究立足于上述觀點(diǎn)進(jìn)行臨床研究的設(shè)計(jì)，用以驗(yàn)證新輔助放化療結(jié)合的模式相比單獨(dú)化療的優(yōu)勢及探討病理完全緩解的病例的是否需要進(jìn)一步治療。
　　放療在縮小、殺滅腫瘤的同時也會導(dǎo)致很多并發(fā)癥，臨床以急性放射性腸炎(Acuteradiation enteritis，ARE)最常見，嚴(yán)重者可導(dǎo)致術(shù)前治療的提前終結(jié)，甚至需要急診外科手術(shù)干預(yù)，這對提高直腸癌病例的整

4、體治療效果影響頗大，本研究的第三部分對新輔助放療導(dǎo)致的放射性腸炎進(jìn)行臨床觀察，利用中藥煎劑保留灌腸的方法，探討清熱解毒方防治放射性腸炎的療效及作用機(jī)制，以期為臨床防治急性放射性腸炎提供參考與指導(dǎo)。
　　第一部分直腸癌細(xì)胞新輔助放化療后的超微結(jié)構(gòu)改變及癌組織SATB1的表達(dá)
　　目的：通過觀察直腸癌細(xì)胞在新輔助放化療后超微結(jié)構(gòu)的變化及癌組織SATB1的表達(dá)情況，探討新輔助放化療對直腸癌細(xì)胞損傷作用的機(jī)制，以及新輔助放療敏感性與

5、SATB1的關(guān)系。
　　方法：納入2011年7月～2013年12月的83例低位局部進(jìn)展期直腸癌的患者，其中接受化療者35例，接受聯(lián)合放化療者48例，于治療前、治療中及治療后分別取直腸癌組織及癌旁組織進(jìn)行電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察，并檢測新輔助放化療前、術(shù)后標(biāo)本的直腸癌組織及癌旁組織SATB1的免疫組化表達(dá)。
　　結(jié)果：①反應(yīng)較好的細(xì)胞于治療的中期即開始出現(xiàn)凋亡或細(xì)胞器的嚴(yán)重?fù)p傷，出現(xiàn)核固縮，線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的腫脹，反應(yīng)差的細(xì)胞則細(xì)胞器

6、沒有破壞或輕度損傷。②接受放療的病例細(xì)胞損傷程度明顯高于未接受放療的病例，各種類型的損傷均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);放療對癌細(xì)胞的損傷作用較癌旁正常組織明顯。③SATB1在直腸癌組織中的表達(dá)比正常直腸粘膜強(qiáng)，且在Ⅲ期直腸癌組織表達(dá)最高，差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。④對放療效果較差的病例，術(shù)后標(biāo)本較術(shù)前標(biāo)本的SATB1表達(dá)明顯增高。
　　結(jié)論：放療對于直腸癌細(xì)胞具有明顯的損傷作用，放化療聯(lián)合對比單純化療導(dǎo)致更明顯

7、的細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷，并增加了對細(xì)胞核的破壞。SATB1的表達(dá)與腫瘤浸潤程度有關(guān)，且其過度表達(dá)與放療抵抗有一定的相關(guān)性。
　　第二部分;低位局部進(jìn)展期直腸癌新輔助放化療的近期療效評價及病理完全緩解病例的后續(xù)治療方案
　　目的：評價直腸癌新輔助放化療的有效性及安全性，探討低位直腸癌新輔助放化療后病理完全緩解病例的后續(xù)治療方案。
　　方法：①回顧性分析2008年1月～2014年01月納入的166例低位局部進(jìn)展期直腸癌的患者，其

8、中接受化療者70例，接受聯(lián)合放化療者96例，比較兩組的不良反應(yīng)發(fā)生率、腫瘤緩解情況、組織病理學(xué)療效、術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率、腫瘤切除率和保肛率等指標(biāo)的變化。②回顧性分析14例接受新輔助放化療后達(dá)到病理完全緩解病例的臨床資料。
　　結(jié)果：①兩組間不良反應(yīng)除大便性狀改變和皮膚黏膜損傷發(fā)生率聯(lián)合組高于化療組外(x2值=13.898，P=0.002;x2值=10.747，P=0.008)，其余無明顯差異;聯(lián)合組腫瘤緩解率(x2值=10.214，

9、P=0.001)，組織病理學(xué)腫瘤消退率（x2值=10.386，P=0.001）均高于化療組;聯(lián)合組根治性切除率(x2值=4.356，P=0.037)及保肛率(x2值=4.352，P=0.037)亦高于化療組;術(shù)后并發(fā)癥兩組無顯著差異。②14例病理完全緩解的患者中接受手術(shù)者10例，隨訪發(fā)現(xiàn)，未手術(shù)者中有3例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，其中1例死亡;手術(shù)病例中2例復(fù)發(fā)，無死亡病例。
　　結(jié)論：①新輔助放化療具有明顯的細(xì)胞損傷作用，對于直腸癌的降期，提高

10、手術(shù)根治性切除率和保肛率具有明顯優(yōu)勢，且無明顯不良反應(yīng)及嚴(yán)重手術(shù)并發(fā)癥。②接受新輔助放化療達(dá)到病理完全緩解的病例，應(yīng)接受規(guī)范的全直腸系膜切除術(shù)以達(dá)到根治的目的。
　　第三部分清熱解毒方保留灌腸防治急性放射性腸炎的療效研究
　　目的：中藥煎劑灌腸治療急性放射性腸炎的療效觀察及機(jī)理探討。
　　方法：納入2011年7月～2013年12月直腸癌病例共48例，隨機(jī)分為中藥灌腸治療組24例及對照組24例，治療組自放療開始予中藥煎劑

11、灌腸治療，療程至放療結(jié)束。統(tǒng)計(jì)兩組病例各級放射性腸炎的發(fā)生率，觀察腸粘膜組織病理學(xué)變化及超微結(jié)構(gòu)變化。
　　結(jié)果：①治療組經(jīng)中藥灌腸干預(yù)后，未發(fā)生放射性腸炎的病例數(shù)明顯多于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2值=4.923,P=0.027)。兩組間1級和3級放射性腸炎的發(fā)生率無顯著差異，但治療組2級放射性腸炎的發(fā)生率明顯低于對照組(x2值=5.829，P=0.016）。②治療組炎癥細(xì)胞的浸潤及黏膜潰瘍的發(fā)生率均低于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)

12、學(xué)意義(x2值=4.246，P=0.039;x2值=4.148，P=0.042);腺體增生變形的發(fā)生率及粘液分泌增多的發(fā)生率亦顯著低于對照組(x2值=4.932，P=0.027;x2值=4.090，P=0.043)，但小血管的變化兩組間無顯著差異(x2值=2.116，P=0.146)。③透射電鏡下的超微結(jié)構(gòu)觀察到治療組病例的粘液顆粒增加比例顯著低于對照組(x2值=5.371，P=0.020)。
　　結(jié)論：①中藥煎劑灌腸能很好地預(yù)防