靜電紡纖維載藥系統(tǒng)動(dòng)物體內(nèi)應(yīng)用的療效研究.pdf

1、目的:
　　靜電紡纖維作為組織工程支架及藥物控釋載體已有廣泛研究。本論文通過靜電紡纖維內(nèi)復(fù)合碳酸氫鈉(NaHCO3)的方法構(gòu)建具有酸度敏感的三維支架，并使其攜載不同的藥物，作為抗炎和抗腫瘤的藥物載體應(yīng)用于相應(yīng)的動(dòng)物模型中，以觀察其生物相容性、安全性，并探討其抗炎及抑制腫瘤的作用機(jī)制。與此同時(shí)，通過聚多巴胺(pDA)對(duì)載藥靜電紡纖維材料進(jìn)行表面改性后，觀察其抑瘤效果的改變。
　　方法:
　　抗炎型靜電紡纖維的體外實(shí)驗(yàn):不

2、同組別的靜電紡纖維支架及其浸提液分別與大鼠成肌細(xì)胞株(L6)共培養(yǎng)，MTT法評(píng)估細(xì)胞毒性、TUNEL染色法檢測細(xì)胞凋亡?？寡仔挽o電紡纖維的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，不同組別的靜電紡纖維支架分別植入皮膚，肌肉受損的大鼠皮膚與骨骼肌內(nèi)，在各時(shí)間點(diǎn)通過組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色、PCR分析等技術(shù)手段檢測其對(duì)皮膚、骨骼肌的修復(fù)情況?？鼓[瘤型靜電紡纖維的體外實(shí)驗(yàn):不同組別的靜電紡纖維支架浸提液與人肝細(xì)胞癌細(xì)胞(HuH-7)、人乳腺癌細(xì)胞(MDA-231)共培

3、養(yǎng)，MTT法評(píng)估細(xì)胞毒性。抗腫瘤型靜電紡纖維的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，不同組別的靜電紡纖維支架分別植入裸鼠皮下肝癌瘤體切除后的殘癌內(nèi)，在各時(shí)間點(diǎn)通過組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色、ELISA檢測、PCR分析等技術(shù)手段檢測其對(duì)殘癌的抑制情況。
　　結(jié)果:
　　1.抗炎型靜電紡纖維的體外實(shí)驗(yàn)中，MTT分析不同組別的靜電紡纖維支架及其浸提液對(duì)L6細(xì)胞無毒性;TUNEL染色顯示不同組別的靜電紡纖維支架浸提液對(duì)細(xì)胞凋亡無明顯促進(jìn)作用?？寡仔挽o電紡纖

4、維支架的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，HE染色結(jié)果顯示其可顯著控制過度炎癥反應(yīng)，對(duì)大鼠骨骼肌急性損傷的愈合有明顯促進(jìn)作用;免疫組化與PCR結(jié)果顯示抗炎型靜電紡纖維支架可抑制促炎型細(xì)胞因子（IL-6和TNF-α）的表達(dá)，而對(duì)促增生型細(xì)胞因子(VEGF、b-FGF、TGF-1)的表達(dá)有促進(jìn)作用?？寡仔挽o電紡纖維支架對(duì)大鼠皮膚急性損傷的愈合也有明顯促進(jìn)作用，HE染色顯示其可顯著控制過度炎癥反應(yīng)，減少皮膚膠原的沉積;免疫組化與Western blot結(jié)果顯示抗炎

5、型靜電紡纖維支架對(duì)細(xì)胞因子b-FGF的表達(dá)有促進(jìn)作用，而對(duì)a-SMA的表達(dá)有抑制作用;PCR結(jié)果顯示collagenⅠ/collagenⅢ和TGF-β1/TGF-β3的比率降低，而MMP-1/TIMP-1的比率增高，提示抗炎型靜電紡纖維支架可減少皮膚疤痕組織的形成，有利于皮膚無疤痕愈合。
　　2.抗腫瘤型靜電紡纖維的體外實(shí)驗(yàn)中，MTT分析不同組別的靜電紡纖維支架浸提液對(duì)Huh-7、MDA-231腫瘤細(xì)胞增殖有明顯抑制作用。抗腫瘤型

6、靜電紡纖維支架的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明其對(duì)殘癌有明顯抑制作用，HE染色結(jié)果顯示其可引起腫瘤細(xì)胞凋亡;ELISA結(jié)果顯示其可減少CRP的表達(dá);免疫組化、ELISA、Westernblot與PCR結(jié)果綜合顯示抗腫瘤型靜電紡纖維支架早期可控制炎癥反應(yīng)，抑制炎癥因子的表達(dá)，后期持續(xù)抑制腫瘤細(xì)胞增殖，下調(diào)IL-6，STAT3和NF-κB的表達(dá)，上調(diào)Caspase-3表達(dá)，并上調(diào)Bcl-2/Bax比值。經(jīng)pDA表面改性后的載藥靜電紡PLLA纖維支架，親水性增

7、強(qiáng)，抑瘤效果顯著提高。
　　結(jié)論:
　　抗炎型靜電紡纖維支架對(duì)大鼠皮膚、骨骼肌急性損傷的愈合有明顯促進(jìn)作用，可顯著控制過度炎癥反應(yīng)，加速愈合;并通過對(duì)疤痕形成相關(guān)的細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)，實(shí)現(xiàn)皮膚無疤痕愈合?？鼓[瘤型靜電紡纖維支架對(duì)殘癌有明顯抑制作用，可實(shí)現(xiàn)早期對(duì)炎癥因子的控制，后期長效抗腫瘤的作用。酸性敏感靜電紡纖維支架可作為安全的藥物載體對(duì)疾病進(jìn)行有效的治療;經(jīng)pDA修飾的載藥靜電紡PLLA纖維支架可以作為有效的藥物載體，用于對(duì)