結(jié)直腸癌IGF2印記丟失與H19 DMR甲基化狀態(tài)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：基因組印記(Genomic Imprinring)是指控制某一表型的一對(duì)等位基因由于親源的不同而呈差異性表達(dá)，即機(jī)體僅轉(zhuǎn)錄來自親本一方的等位基因而與自身性別無關(guān)。所謂印記丟失(Loss of Imprinting，LOI)是指被印記的無活性的等位基因被重新激活。胰島素樣生長因子Ⅱ(Insulin-Like Growth Factor2，IGF2)基因是父源表達(dá)的印記基因，編碼一個(gè)強(qiáng)有力的有絲分裂原，促使細(xì)胞增殖。在多種成人腫瘤中都

2、發(fā)現(xiàn)有IGF2LOI的發(fā)生，意味著胰島素樣生長因子II表達(dá)加倍，可促使細(xì)胞惡性增殖與轉(zhuǎn)化，參與腫瘤的發(fā)生。印記基因IGF2和H19的表達(dá)取決于位于11p15染色體上差異甲基化區(qū)域的甲基化模式。
　　方法：我們檢測(cè)了120個(gè)結(jié)直腸癌病人和150個(gè)正常對(duì)照的IGF2印記情況。以ApaI酶切位點(diǎn)的限制性片段長度多態(tài)性(Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)確定樣本IGF2的基因型，確

3、定用于LOI和甲基化分析的信息樣本。RT-PCR結(jié)合RFLP檢測(cè)信息樣本IGF2的印記狀態(tài)；另外，我們用亞硫酸鹽測(cè)序的方法分析了81個(gè)結(jié)直腸癌病人IGF2/H19甲基化差異區(qū)域第六個(gè)CCCTC結(jié)合因子結(jié)合位點(diǎn)的甲基化情況。
　　結(jié)果：在81個(gè)腫瘤樣本中有51個(gè)顯示了IGF2雙等位基因表達(dá)，即印記丟失，然而，在正常對(duì)照的69個(gè)樣本中只有15個(gè)顯示了IGF2的印記丟失，在腫瘤樣本和正常對(duì)照之間印記丟失率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在腫瘤樣本中印記保