抑制a-葡萄糖苷酶活性中藥的篩選及降血糖效果觀察.pdf

1、目的:
　　 從20味中藥中篩選出對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制作用較強(qiáng)的中藥，對(duì)其提取工藝、酶抑制類型、降血糖作用及機(jī)理進(jìn)行探討。
　　 方法:
　　 1．參考中醫(yī)治療糖尿病的長(zhǎng)期實(shí)踐報(bào)道和國(guó)家衛(wèi)生部公布的藥食同源和保健品名單初步遴選出20味中藥，分別采用水提和醇提兩種方法制備提取物，以麥芽糖為底物，以阿卡波糖為陽性對(duì)照，采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定20味中藥提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用。
　　 2．選取抑制率最高

2、的中藥（桑白皮），采用單因素實(shí)驗(yàn)與正交設(shè)計(jì)相結(jié)合的方法優(yōu)化其提取工藝。
　　 3．通過酶濃度-反應(yīng)速度作圖法確定桑白皮提取物抑制反應(yīng)是否可逆，用Lineweaver-Burk(L-B)作圖法確定其抑制反應(yīng)的類型。
　　 4．用隨機(jī)數(shù)字表將正常小白鼠隨機(jī)分組，然后分別灌胃給藥，每天1次，共7天，末次給藥后進(jìn)行麥芽糖負(fù)荷實(shí)驗(yàn)，尾尖采血，血糖儀測(cè)定血糖值。
　　 5．糖尿病模型小鼠采用腹腔注射鏈脲佐菌素法誘導(dǎo)，分組、給

3、藥和血糖測(cè)定等方法均同正常小鼠。
　　 6．實(shí)驗(yàn)過程中每日在給藥前稱量各組小鼠的攝食量和飲水量、隔日稱量小鼠體重。
　　 結(jié)果:
　　 1.20味中藥水提液和醇提液對(duì)α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用，其中桑葉、桑白皮、山茱萸、玉竹、地骨皮的水提液抑制率較高，濃度為1000mg/mL時(shí)抑制率分別為97.56％、95.89％、72.73％、80.22％和59.06％，桑白皮、桑葉、地骨皮、山茱萸、葛根的醇提液抑制率較

4、高，濃度為1000mg/mL時(shí)抑制率分別為98.94％、94.97％、94.78％、84.27％和81.00％，且這幾種中藥提取液對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用均呈現(xiàn)出一定的濃度效應(yīng)關(guān)系，其中桑白皮的抑制作用與阿卡波糖最相近。
　　 2．桑白皮水提液的最佳提取工藝為固液比1：10、提取時(shí)間1.5h、提取次數(shù)3次；桑白皮醇提液的最佳提取工藝為乙醇濃度45％、固液比1：8、提取時(shí)間12h。
　　 3．桑白皮水提液和醇提液對(duì)q-葡

5、萄糖苷酶的抑制類型均屬于可逆性抑制中的非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。
　　 4．桑白皮各給藥組和阿卡波糖組均能顯著降低正常小鼠麥芽糖負(fù)荷后0.5h和1h時(shí)的血糖值，與生理鹽水組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）：但對(duì)正常小鼠的體重、飲水量和攝食量均無明顯影響，與生理鹽水組相比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 5.桑白皮水提物和醇提物高劑組均能顯著降低糖尿病小鼠麥芽糖負(fù)荷后0.5h、1h、1.5h、2h血糖值,與生理鹽水

6、組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且有類似于阿卡波糖的作用效果(P＞0.05)；桑白皮水提物低劑組能顯著降低糖尿病小鼠麥芽糖負(fù)荷后0.5h血糖值，桑白皮醇提物低劑組能顯著降低糖尿病小鼠麥芽糖負(fù)荷后0.5h、1h、1.5h血糖值，與生理鹽水組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。且桑白皮各給藥組和阿卡波糖組糖尿病小鼠的體重增加、飲水量和攝食量減少，與生理鹽水組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 結(jié)論:<