大越豆芋花中α-葡萄糖苷酶活性抑制成分研究.pdf

1、大越豆芋是一種具有預防高血壓、高血脂,降低患癌癥風險,清除自由基等功能的健康食品。目前研究大多集中在地下塊根(塊莖)。事實上,日本民間有飲用豆芋花茶穩(wěn)定血糖、血脂的習慣,對其降血糖活性部位、有效成分及作用機理的研究卻鮮有報道。α-葡萄糖苷酶抑制劑因能阻止寡糖水解為單糖,降低餐后高血糖,是一類有效的降糖藥。本研究初步探索了篩選大越豆芋花中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的物質(zhì)的方法,建立了體外α-葡萄糖苷酶抑制模型,對豆芋花粗提物進行成分分析和

2、活性比較,篩選出α-葡萄糖苷酶抑制效果較好的成分并進行初步分離純化。本文的主要內(nèi)容有:
　　采用水浴回流、乙醇浸提兩種方法初步提取豆芋花中的活性成分,分別檢測其α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性,發(fā)現(xiàn)醇提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性強于水提物,前者的IC50值為2.04mg/mL,后者為5.64mg/mL;而抗氧化活性則相反。選擇α-葡萄糖苷酶抑制活性較好的醇提物,采用有機溶劑萃取法對其水溶液進行分離,得到石油醚相、正丁醇相、乙酸乙

3、酯相和水相四個分極組分,再次比較其抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性。乙酸乙酯相中皂苷含量最高,為29.04％(占提取物),且顯示了較好的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,其DPPH、ABTS的IC50值,FRAP值及α-葡萄糖苷酶的 IC50值分別為77.54μg/mL、14.42μg/mL、6676.28μmol/L及137.12μg/mL,其中活性最高的為皂苷成分。對乙酸乙酯相8種酚類物質(zhì)(對香豆酸、異牡荊苷、牡荊苷、異葒草苷、

4、葒草苷、咖啡酸、綠原酸、苜蓿素)的HPLC分析發(fā)現(xiàn),乙酸乙酯相中含有綠原酸、咖啡酸、牡荊苷和異牡荊苷四種成分,且含量依次為0.5234、0.0212、0.0045和0.0185mg/g。
　　用響應面法優(yōu)化豆芋花皂苷的提取工藝。在單因素實驗的基礎上,考察液料比、提取時間和乙醇濃度對總皂苷含量的影響,通過三因素三水平的中心組合實驗,建立回歸模型,得到最佳提取工藝:液料比20:1,提取時間2h,乙醇濃度90%。在此條件下得到的總皂苷含

5、量為7.18%,與預測值基本相符。為得到含量較高的豆芋花總皂苷,用大孔樹脂吸附法純化乙酸乙酯相,驗證其活性。大孔樹脂吸附的最佳工藝參數(shù)為:樹脂類型D101,上樣濃度2.0mg/mL,上樣量60mL,吸附時間3h,解吸液乙醇體積分數(shù)80%,解吸液用量100mL,解吸液pH=7。此法制備的豆芋花總皂苷含量為69.26%,其抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性相對于乙酸乙酯相有明顯提高。
　　本文從大越豆芋花中篩選出了對α-葡萄糖苷酶具有