豆豉中α-葡萄糖苷酶抑制成份的分離、純化及特性研究.pdf

1、本課題綜合評(píng)價(jià)了豆豉水提物對(duì)于小鼠腸道內(nèi)的α-葡萄糖苷酶的體外抑制活性，初步推斷豆豉樣品產(chǎn)生α-葡萄糖苷酶抑制活性的機(jī)理，并從高活性的豆豉樣品中分離、純化α-葡萄糖苷酶抑制活性成份；此外，利用三種霉菌制備純種發(fā)酵豆豉，分別為米曲霉(Aspergillus oryzae 3.951)型、毛霉(Actinomucor elegans 3.118)型和根霉(Rhizopus arrhizus 3.078)型豆豉，分析豆豉的生產(chǎn)工藝與其α-葡萄

2、糖苷酶抑制活性之間的內(nèi)在關(guān)聯(lián)；最后，對(duì)豆豉中分離純化得到的α-葡萄糖苷酶抑制活性成份進(jìn)行理化特性分析，并進(jìn)一步對(duì)豆豉樣品水提物及其純化的α-葡萄糖苷酶抑制活性成份進(jìn)行α-淀粉酶的體外抑制試驗(yàn)研究，最終得到如下結(jié)論： 1．我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵的豆豉均對(duì)小鼠腸道內(nèi)的α-葡萄糖苷酶具有抑制活性，其抑制斜率值(Ki)由0.5～13.8不等，其中5＃(L、Y)豆豉、16＃(W．N．H)豆豉、以及21＃(M．w)豆豉水提物對(duì)α-葡萄糖苷酶具有較強(qiáng)的

3、抑制活性(p<0.05)，其抑制斜率值(Ki)分別為13.063，13.863和12.230：同時(shí)對(duì)我國(guó)另一種大豆發(fā)酵食品——腐乳進(jìn)行體外α-葡萄糖苷酶抑制試驗(yàn)，結(jié)果顯示腐乳水提物的α-葡萄糖苷酶抑制能力均較弱，Ki值均在5.0以下； 2．使用米曲霉(A．oryzae 3．951)、雅致放射毛霉(A．elegans 3.118)及少孢根霉(R．a(chǎn)rrhizus3.078)純種發(fā)酵的豆豉，在前發(fā)酵階段豆豉曲的α-葡萄糖苷酶抑制活性

4、均隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)而略有增強(qiáng)；在后發(fā)酵階段，豆豉的α-葡萄糖苷酶抑制活性也呈增強(qiáng)趨勢(shì)，其中米曲霉(A．oryzae3．951)型發(fā)酵的豆豉在后酵4周后時(shí)表現(xiàn)較強(qiáng)的抑制活性(p<0.05)；毛霉(A．elegans 3.118)和根霉(R．a(chǎn)rrhizus 3.078)型發(fā)酵的豆豉活性要相對(duì)弱些；此外在豆豉后酵過(guò)程中不同的食鹽添加量也對(duì)豆豉的α-葡萄糖苷酶抑制活性產(chǎn)生影響，5.O％和7.5％的加鹽量制得的豆豉要比加鹽量為10.O％和12

5、.5％的豆豉活性要高； 3．豆豉中α-葡萄糖苷酶抑制成份使用Sephadex G-25以及Polyacrylamide-20分離，確定為分子量在1000D以下的小分子物質(zhì)；利用高效液相色譜(HPLC)進(jìn)行初步純化，最終在230nm波長(zhǎng)下保留時(shí)間為1.9-2.1 min之間得到一單峰，經(jīng)體外抑制試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示，此峰物質(zhì)對(duì)cL一葡萄糖苷酶具有較強(qiáng)的抑制活性； 4．豆豉水提物經(jīng)熱處理(100"C，30min)和纖維素酶處理(