胃癌組織中P53、MMP-2、E-cadherin的表達(dá)及臨床意義的研究.pdf

1、目的：惡性腫瘤性疾病作為威脅人類健康主要疾病之一，人類對其進行了廣泛及深入的研究。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特征，是一具有多步驟、多因素、多因子共同參與的復(fù)雜過程?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究認(rèn)為，惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展至少需要2個或2個以上活化的癌基因協(xié)同作用才能使正常細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。對腫瘤研究的過程中揭示了許多癌基因、抑癌基因及腫瘤相關(guān)基因點位，探討它們的作用機制以期為臨床治療提過新的靶點成為腫瘤研究的熱點。本研究旨在

2、探討p53基因和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和E--鈣黏附素(E-cadherin)的表達(dá)程度和功能活性狀態(tài)與腫瘤發(fā)生及癌細(xì)胞的浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化關(guān)系，以及p53、MMP-2和E-cadherin表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系。對它們的獨立因素研究已經(jīng)較為廣泛和深入，現(xiàn)有必要進行多基因聯(lián)合表達(dá)的綜合評估，從而有可能獲得有關(guān)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為，包括其形成、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)方面的新發(fā)現(xiàn)。
　　 方法：收集自2000年6月至2005年6

3、月保定市第一醫(yī)院60例胃癌根治術(shù)患者標(biāo)本，所有患者術(shù)前均未經(jīng)任何抗癌治療。60例中男性38例，女性22例，平均年齡61.6歲。按Lauren組織學(xué)分型，以UICC制定的TNM分期判定腫瘤浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移及胃癌分期。所有胃癌組織標(biāo)本均由病理組織學(xué)確診。胃賁門部20例，竇部16例，胃體部13例，胃底11例。高分化癌16例，中分化癌14例，低/未分化癌30例，癌細(xì)胞浸潤至粘膜層7例，癌細(xì)胞浸潤至肌層13例，癌細(xì)胞浸潤至漿膜層34例，癌細(xì)胞浸

4、潤至漿膜外6例；有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例，無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例，其中6例遠(yuǎn)處廣泛轉(zhuǎn)移。全部標(biāo)本經(jīng)10％中性甲醛液固定24小時，石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，常規(guī)HE染色，免疫組化按S-P試劑盒說明書進行操作。正常胃粘膜切片為陰性對照。檢測60例胃癌組織中p53、MMP-2和E-cadherin蛋白表達(dá)水平。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：p53：蛋白均以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒為陽性表達(dá)。陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的25％以上為陽性，＜25％為陰性。E-cadherin

5、:細(xì)胞膜有棕黃色顆粒沉著為正常表達(dá)，陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的25％以上為正常表達(dá)，＜25％為異常表達(dá)。MMP-2:胞膜和胞質(zhì)內(nèi)顯示棕黃色顆粒或團塊者視為為陽性表達(dá)。陽性細(xì)胞＜10％者為陰性(-)，≥10％者為陽性(+)。
　　 結(jié)果：P53在胃癌組織中表達(dá)陽性率為55％，在癌周正常組織中表達(dá)為陰性，患者年齡、腫瘤大小、部位、分化程度和TNM分期的P53陽性表達(dá)率無統(tǒng)計學(xué)意義，與文獻(xiàn)報道相似。P53的表達(dá)與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)

6、，浸透漿膜層的及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中的P53表達(dá)陽性率明顯高于未浸透漿膜層的和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。MMP-2在胃癌組織中表達(dá)多呈強陽性，陽性率為68.7％，在癌旁組織中多呈弱陽性表達(dá)?；颊吣挲g、腫瘤大小、部位的P53陽性表達(dá)率無統(tǒng)計學(xué)意義，在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的胃癌組織中表達(dá)率為77.8％，明顯高于Ⅰ、Ⅱ期的54.1％(P＜0.01)。低/未分化胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽性率為88.3％，明顯高于高

7、分化和中分化胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽性率；浸透漿膜層胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽性率為76.0％，明顯高于未浸透漿膜層胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽性率；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽性率為77.1％，明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽性率；E-cadherin在正常胃粘膜組織中表達(dá)陽性率為100％，在胃癌組織中表達(dá)陽性率為56.7％，有顯著差別(P＜0.05)。患者年齡、腫瘤大小、部位的E-cadherin陽性表達(dá)

8、率無統(tǒng)計學(xué)意義。在低/未分化的胃癌組織中E-cadherin減弱表達(dá)率明顯低于高中分化的胃癌組織；在浸透漿膜層的胃癌組織中E-cadherin減弱表達(dá)率明顯低于未浸透漿膜層的胃癌組織；在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的胃癌組織中表達(dá)率為36.1％，明顯低于Ⅰ、Ⅱ期的87.5％(P＜0.01)。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中E-cadherin減弱表達(dá)率明顯低于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的胃癌組織。由此可分析，癌與癌周組織其表達(dá)陽性率的差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0

9、5);MMP-2，E-cadherin的表達(dá)不僅與Lauren組分型、TNM分期有關(guān)，P53、MMP-2，E-cadherin的表達(dá)均與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。P53、MMP-2表達(dá)陽性者E-cadherin陰性率高，相關(guān)系數(shù)-0.37，經(jīng)檢驗具有統(tǒng)計學(xué)意義。胃癌組織中P53的表達(dá)與MMP-2表達(dá)呈正相關(guān)，P53、MMP-2與E-cadherin表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)，隨著胃癌腫瘤的進展，胃癌組織中E-cadherin表達(dá)呈逐漸下降趨勢，而

10、P53，MMP-2表達(dá)則明顯的升高。胃癌組織中MMP-2表達(dá)在分化程度越低、分期越晚的陽性率越高，反之，E-cadherin異常表達(dá)率越低。E-cadherin、MMP-2表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，隨著胃癌的進展，胃癌組織中E-cadherin表達(dá)逐漸下降，MMP-2表達(dá)則明顯升高。分化程度低、分期晚的E-cadherin異常表達(dá)率越低的胃癌組織中的MMP-2陽性率明顯高于中高分化程度、分期早的。胃癌組織中侵襲程度強伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性患者P53、M

11、MP-2、E-cadherin的異常表達(dá)率明顯高于陰性患者，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：p53、MMP-2和E-cadherin的表達(dá)與胃癌癌淋巴結(jié)侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，其所導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞增殖及微血管的形成與侵犯轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。且三者之間有著明顯的關(guān)聯(lián)性，在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中有著協(xié)同及促進作用。p53基因突變后MMP-2表達(dá)增強，E-cadherin表達(dá)逐漸下降，MMP-2表達(dá)則明顯升高。因此聯(lián)合檢測p53、MMP-2