大麻素WIN55，212-2對體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞PGE-,2-表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究大麻素WIN55,212-2對體外培養(yǎng)的牛眼小梁細(xì)胞前列腺素E2(PGE2)表達(dá)的影響，從而探討大麻素WIN55,212-2可能的降眼壓機制。
　　 方法：1、牛眼小梁細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定：采用組織塊培養(yǎng)法對牛眼小梁細(xì)胞進行原代培養(yǎng)，取第三代細(xì)胞使用免疫組織化學(xué)法對培養(yǎng)的小梁細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、波形蛋白及第Ⅷ因子相關(guān)抗原的表達(dá)進行鑒定。2、ELISA法測定小梁細(xì)胞上清液中PGE2濃度：將培養(yǎng)于96孔板的第四

2、代細(xì)胞隨機分為7組，每組10個復(fù)孔，分別施加含大麻素WIN55,212-2終濃度為0μmol/L，0.1μmol/L，1μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，40μmol/L，60μmol/L的不含血清培養(yǎng)液，培養(yǎng)24小時后運用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定不同濃度大麻素WIN55,212-2作用后牛眼小梁細(xì)胞上清液中PGE2水平的變化情況。3、RT-PCR測定細(xì)胞內(nèi)PGE2mRNA的表達(dá)：取第四代小梁細(xì)胞，運用反轉(zhuǎn)錄聚合

3、酶鏈?zhǔn)綌U增(RT-PCR)方法檢測含大麻素WIN55,212-2終濃度為0μmol/L，0.1μmol/L，1μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，40μmol/L，60μmol/L的含血清培養(yǎng)液作用后24小時PGE2mRNA在小梁細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：經(jīng)含0μmol/L，0.1μmol/L，1μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，40μmol/L，60μmol/L不同濃度大麻素WIN55,21