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1、目的:腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)不僅僅是一個(gè)循環(huán)調(diào)節(jié)系統(tǒng),還是一個(gè)局部?jī)?nèi)分泌系統(tǒng),在體內(nèi)許多局部組織均發(fā)現(xiàn)了RAS各組分的表達(dá)。眼局部組織中RAS各組分的表達(dá)及其功能正在不斷取得進(jìn)展。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)檢測(cè)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶在體外培養(yǎng)的牛眼小梁細(xì)胞中的表達(dá)情況,初步探討血管緊張素轉(zhuǎn)換酶與青光眼眼壓調(diào)節(jié)及房水循環(huán)之間的關(guān)系。 方法:體外培養(yǎng)牛眼小梁細(xì)胞,傳代后制作細(xì)胞爬片,利用免疫細(xì)胞化學(xué)染色SP法檢測(cè)體外培養(yǎng)的牛眼小梁細(xì)胞中血管緊張
2、素轉(zhuǎn)換酶蛋白的染色情況。提取小梁細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄,運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)體外培養(yǎng)的牛眼小梁細(xì)胞中血管緊張素轉(zhuǎn)換酶mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果:免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)示體外培養(yǎng)的牛眼小梁細(xì)胞胞膜和胞漿中可見血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的陽(yáng)性染色,陰性對(duì)照未見明顯染色。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)可檢測(cè)到血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的mRNA。 結(jié)論:血管緊張素轉(zhuǎn)換酶在體外培養(yǎng)的牛眼小梁細(xì)胞中為陽(yáng)性表達(dá),而小梁細(xì)胞是房水排除系統(tǒng)
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