低氧對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：①觀察低氧環(huán)境對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞血管緊張素2(ACE2)表達(dá)的影響；②初步探討低氧影響人血管內(nèi)皮AcE2表達(dá)的機(jī)制。 方法：采用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(HUV-EC-C)，進(jìn)行貼壁細(xì)胞培養(yǎng)；采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)細(xì)胞株進(jìn)行Ⅷ因子鑒定；設(shè)立低氧實(shí)驗(yàn)組與常氧對(duì)照組。低氧組條件為1％O<,2>+94％N<,2>+5％CO<,2>，常氧對(duì)照組的細(xì)胞置于5％CO<,2>孵箱內(nèi)培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)不同時(shí)間3h、6h、12h、24h，收集培養(yǎng)液和

2、細(xì)胞；采用免疫組化鑒定ACE2蛋白合成情況，實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR，檢測(cè)ACE2 mRNA表達(dá)情況，并用REST軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：①與常氧組對(duì)照，低氧3H，6H，12H，24H組，ACE2蛋白表達(dá)均有所下降，X<'2>值分別為825.078、768.141、623.931、350.260，P均小于0.00625。其中低氧3H組的陽(yáng)性率最低為14.53％，并且隨時(shí)間呈現(xiàn)逐漸上升趨勢(shì)；②與常氧對(duì)照組相比，低氧3H，6H

3、，12H，24H組，ACE2基因均有所下降。其中低氧3H組ACE2 mRNA相對(duì)表達(dá)率為0.281(P=0.031)，低氧6H組為0.445(P=0.034)，低氧12H組為0.794．(P=0.434)，低氧24H組為0.891(P=0.692)。 結(jié)論：在24小時(shí)內(nèi)，低氧使人血管內(nèi)皮細(xì)胞ACE2蛋白的合成以及ACE2mRNA的表達(dá)減少，并且以3小時(shí)最為明顯，后出現(xiàn)逐漸升高趨勢(shì)。這種先減少后增加的趨勢(shì)，提示逐漸升高的ACE2對(duì)