血管緊張素Ⅱ刺激人足細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子信號(hào)通路的研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)刺激人足細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的變化，探明AngⅡ刺激足細(xì)胞表達(dá)VEGF的機(jī)制，AngⅡ是否可以通過(guò)p38絲裂原蛋白激酶(p38MAPK)信號(hào)通路調(diào)控足細(xì)胞VEGF的表達(dá)。 方法：①AngⅡ分別以不同劑量(1nM、10nM、100nM)孵育足細(xì)胞，觀察VEGFmRNA的表達(dá)水平；②根據(jù)實(shí)驗(yàn)①的結(jié)果確定AngⅡ刺激劑量孵育足細(xì)胞3、6、12、24小時(shí)，觀察VEGFmRNA的表達(dá)水

2、平；③以不同劑量含氯沙坦大鼠血清與100nM AngⅡ共同孵育足細(xì)胞，觀察VEGFmRNA的表達(dá)水平；④以p38MAPK特異性抑制劑SB203580(1μM、5μM、10μM)預(yù)處理足細(xì)胞1小時(shí)后，加入100nM AngⅡ孵育足細(xì)胞24小時(shí)，觀察足細(xì)胞VEGF及p38MAPK的表達(dá)水平。 結(jié)果：①經(jīng)不同劑量的AngⅡ刺激后足細(xì)胞VEGFmRNA表達(dá)呈劑量依賴性增加，10nM、100nM劑量組與正常組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

3、5)；②根據(jù)實(shí)驗(yàn)①的結(jié)果以100nMAngⅡ孵育足細(xì)胞3，6，12，24小時(shí)，發(fā)現(xiàn)VEGFmRNA表達(dá)呈時(shí)間依賴性增加，所有時(shí)間組與正常組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；③含氯沙坦大鼠血清干預(yù)后，可以明顯抑制AngⅡ刺激足細(xì)胞VEGFmRNA的表達(dá)，并呈劑量依賴性，中、大劑量組與刺激組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；④經(jīng)不同劑量的SB203580預(yù)處理足細(xì)胞1小時(shí)后，再以AngⅡ 100nM孵育足細(xì)胞24小時(shí)，p38MAPK蛋白

4、表達(dá)呈劑量依賴性減少，所有劑量組與刺激組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，VEGFmRNA及蛋白表達(dá)也呈劑量依賴性減少，所有劑量組與刺激組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：AngⅡ可以劑量及時(shí)間依賴性引起VEGF的表達(dá)增加：氯沙坦可以阻斷AngⅡ?qū)ψ慵?xì)胞的作用，劑量依賴性使VEGF表達(dá)減少；SB203580通過(guò)阻斷p38MAPK信號(hào)通路使足細(xì)胞VEGF表達(dá)減少；因此，我們認(rèn)為AngⅡ可以通過(guò)p38MAPK信號(hào)通路調(diào)控