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文檔簡介
1、本研究以榨菜(Brassica juncea(L.) Czern.et Coss.var.tumida Tsen et Lee)與紫甘藍(B.oleracea L.var.capitata L.)種間雜種H0(基因組ABC)作為實驗材料,利用秋水仙素誘導三倍體雜種H0染色體加倍得到六倍體S0(基因組AABBCC)。在進行倍性鑒定后,將S0與蕓薹屬作物進行回交、雜交,以創(chuàng)制新種質;同時將其自交一代(得S1代),對S1進行植物與分子特性初探
2、,以揭示蕓薹屬遠緣雜交過程中的遺傳、表觀遺傳變化規(guī)律及其生產應用前景。主要實驗結果如下:
(1)異源六倍體植株(S0)及其自交后代(S1)的獲得及性狀觀察:對三倍體H0的莖段進行秋水仙素處理,成功得到異源六倍體S0,結果表明100 mg/L秋水仙素的加倍效果最好,S0育性顯著高于H0,蕾期授粉獲得自交后代S1。低溫長日照誘導開花實驗結果顯示,與榨菜相比,S1更耐抽薹。
(2)蕓薹屬蔬菜新種質的創(chuàng)制:將S0與榨菜、白菜
3、進行雜交,成功得到基因組為AABBC與AABC的蕓薹屬新種質。雜交后代形態(tài)與榨菜、白菜相比,表現(xiàn)出葉色明顯加深,葉型變圓,葉面積變大等特點,但總體外觀仍有很高的相似度,有望成為新型蔬菜品種。
(3)S1生理生化指標分析:S1中烯基GS含量(包括2-羥基-3-丁烯基GS、2-丙烯基GS及3-丁烯基GS)顯著高于親本,而可溶性糖、蛋白含量、保護酶活性(SOD、POD、CAT、APX)則表現(xiàn)出中間型。
(4)雜交后代分子水
4、平分析:采用SRAP技術分析雜種后代與親本在遺傳上的差異,結果顯示,雜交過程導致大量親本條帶丟失(19.5%),且多數為紫甘藍特有條帶,而在加倍后,染色體組趨于穩(wěn)定,說明雜交比加倍對基因組的影響更大;運用MSAP技術分析S1與親本間的DNA甲基化的模式和水平上的差異,結果顯示,S1總甲基化水平與親本相比顯著降低(S1為50.5%,榨菜為60.1%,紫甘藍為63.2%),且其甲基化模式主要遺傳自榨菜,這與遺傳上的差異規(guī)律相同;運用MSAP
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