與EMT相關(guān)的E-cadherin及Snail在甲狀腺癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、甲狀腺癌是頭頸部比較常見的惡性腫瘤，也是人體內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤。甲狀腺癌占人體惡性腫瘤的0.8％-1％，近年來有上升的趨勢(shì)。女性多于男性，發(fā)病年齡一般是21-45歲，以四十歲左右中年人居多。甲狀腺癌按病理類型分為乳頭狀腺癌、濾泡狀腺癌、髓樣癌和未分化癌，其他還有巨細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、透明細(xì)胞癌等。甲狀腺癌的轉(zhuǎn)移途徑與其他癌癥一樣，包括血行轉(zhuǎn)移、淋巴轉(zhuǎn)移、直接侵潤，由于位置表淺，一般無播散轉(zhuǎn)移，而以淋巴轉(zhuǎn)移為主，最常以頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

2、移為主?？偟膩碚f甲狀腺癌的預(yù)后較好，病理類型和腫瘤轉(zhuǎn)移是影響預(yù)后的主要因素。
　　 腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要特征之一，也是惡性腫瘤區(qū)別良性腫瘤最主要的特征，通常是大多數(shù)腫瘤治療失敗的主要原因，也是導(dǎo)致惡性腫瘤患者死亡的首要因素。探討腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制是腫瘤研究中的重點(diǎn)。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為細(xì)胞多次基因突變的積累導(dǎo)致了腫瘤的發(fā)生及其侵襲轉(zhuǎn)移。但Selfior等研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)移過程中并無特異的基因變異或突變。因此，腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移可能是

3、組織結(jié)構(gòu)的重新塑造過程，而并非遺傳學(xué)改變的結(jié)果。腫瘤的侵潤轉(zhuǎn)移主要有以下幾個(gè)步驟：①腫瘤細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial- mesenchymal transition，EMT)，細(xì)胞黏附性降低，喪失細(xì)胞-細(xì)胞間連接的腫瘤細(xì)胞從原發(fā)性腫瘤病灶中分離，脫離原發(fā)灶；②與細(xì)胞外基質(zhì)緊密附著，降解基質(zhì)穿透基底膜，進(jìn)入血管或者淋巴管；③在失巢凋亡情況下存活；④移出或滲出血管或淋巴管；⑤形成微型轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)；⑥適應(yīng)周圍基質(zhì)環(huán)境，經(jīng)過間質(zhì)上皮

4、轉(zhuǎn)化(mesenchymal-epithelialtransition，MET)，再次表現(xiàn)出上皮細(xì)胞的特性，重新獲得增值能力，形成轉(zhuǎn)移灶?？梢姁盒阅[瘤的的轉(zhuǎn)移與上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)的發(fā)生有著密切的關(guān)系。
　　 1982年，Garry Greenburg和Hay在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)晶狀體上皮細(xì)胞在膠原凝膠中形成偽足，轉(zhuǎn)變?yōu)殚g質(zhì)細(xì)胞樣的形態(tài)，于是首次提出EMT的概念

5、。之后，大量相關(guān)研究證實(shí)該轉(zhuǎn)化過程參與哺乳動(dòng)物體內(nèi)一系列特定的生理學(xué)和病理學(xué)過程。如EMT在胚胎發(fā)育、創(chuàng)傷愈合、組織重建、心瓣膜和顱面結(jié)構(gòu)以及肌肉骨骼系統(tǒng)的形成等過程中扮演了重要的角色。在多種慢性疾病，譬如肺纖維化，腎纖維化等的發(fā)生發(fā)展中EMT也起著重要的作用。由于EMT降低了腫瘤細(xì)胞的黏附能力，導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，因此EMT與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。隨著這一認(rèn)知在全球范圍內(nèi)成為共識(shí)，2003年舉行的第一屆國際EMT會(huì)議將EM

6、T正式定義：上皮細(xì)胞經(jīng)歷多重生物化學(xué)改變以獲得間充質(zhì)細(xì)胞表型的過程。通過EMT，上皮細(xì)胞失去了細(xì)胞極性，細(xì)胞松散，黏附能力下降，失去與基底膜的連接，細(xì)胞形態(tài)由多邊形變?yōu)樗笮蔚睦w維細(xì)胞樣形態(tài)，這些上皮表型消失，而轉(zhuǎn)化為具有較高的遷移與侵襲、抗凋亡和降解細(xì)胞外基質(zhì)的能力等間質(zhì)表型。具體過程包括以下幾點(diǎn)(1)細(xì)胞黏附分子（如E-鈣黏蛋白）表達(dá)減少，導(dǎo)致立方上皮細(xì)胞失去細(xì)胞間相互作用；(2)立方上皮細(xì)胞的細(xì)胞角蛋白結(jié)構(gòu)改變，外形演變?yōu)榧忓N形纖維

7、細(xì)胞形態(tài)；(3)獲得了纖維原細(xì)胞或間質(zhì)細(xì)胞的“特性”，如波形蛋白、骨橋蛋白、Snail、Ⅰ型膠原酶及其他間質(zhì)蛋白表達(dá)的上調(diào)。在基礎(chǔ)研究中，這些蛋白常用作發(fā)生EMT的標(biāo)志，細(xì)胞獲得較強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移的能力。
　　 綜上所述EMT與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。而EMT最重要的標(biāo)志性變化就是E-鈣黏蛋白(E-cadherin)的減少和丟失。在上皮細(xì)胞發(fā)生間質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化以及癌癥發(fā)生過程中，經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)E-cadherin表達(dá)的下調(diào)或E-cad

8、herin-環(huán)連蛋白復(fù)合物功能的失調(diào)。鈣黏蛋白是上皮組織中的一類依賴Ca2+的細(xì)胞間粘連跨膜糖蛋白分子，主要參與細(xì)胞間的連接，分為E-cadherin、P-cadherin和N-cadherin三種。E-cadherin在成人的上皮細(xì)胞中表達(dá)，P-cadherin在成人的胎盤和上皮細(xì)胞中表達(dá)，N-cadherin在成人的肌肉和神經(jīng)組織中表達(dá)。維持穩(wěn)定的細(xì)胞連接需要E-cadherin的存在。EMT受多種機(jī)制調(diào)控，而轉(zhuǎn)錄因子環(huán)節(jié)是非常重要

9、的環(huán)節(jié)，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中，轉(zhuǎn)錄因子位于蛋白激酶下游，與EMT密切相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子有Snail、Slug、Twist、ZEB1、Smad、NF-kB等，Snail蛋白是最重要的一類轉(zhuǎn)錄因子。近年來，對(duì)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究已成為一個(gè)熱點(diǎn)，大量的研究表明，其與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移，細(xì)胞凋亡，多藥耐藥等相關(guān)。對(duì)EMT的深入研究對(duì)于腫瘤的價(jià)值不言而喻。本課題通過SP免疫組化的方法檢測(cè)各種不同階段甲狀腺癌組織及甲狀腺瘤組織中Snail及E-cadherin表達(dá)情況

10、，初步探討EMT與甲狀腺癌發(fā)生，發(fā)展的關(guān)系。旨在為預(yù)防甲狀腺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移提供一個(gè)新的檢測(cè)途徑，以便更好的指導(dǎo)臨床腫瘤治療中的一些棘手問題的解決。
　　 本研究得出如下結(jié)論：⑴E-cadherin低表達(dá)，Snail蛋白的高表達(dá)可能是甲狀腺瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要生物學(xué)標(biāo)志之一。⑵E-cadherin的低表達(dá)，Snail蛋白的高表達(dá)可能會(huì)增加腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移的能力。⑶Snail蛋白可能通過E-cadherin介導(dǎo)甲狀腺癌組織的EMT