Stat5、P-Stat5、E-cadherin及Vimentin在甲狀腺癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景和目的：
　　在內(nèi)分泌系統(tǒng)與頭頸部的惡性腫瘤中，甲狀腺癌的發(fā)病率居首位，并且近年來(lái)其發(fā)病率呈逐年明顯上升趨勢(shì)，其中乳頭狀癌及微小乳頭狀癌的增長(zhǎng)為著。有研究認(rèn)為發(fā)病趨勢(shì)的增長(zhǎng)或與過(guò)度診斷及健康體檢的普及有關(guān)，但也有研究表明甲狀腺癌早期有較好的預(yù)后，同時(shí)對(duì)于有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及較大的浸潤(rùn)性的甲狀腺癌，預(yù)后則很差，據(jù)報(bào)道機(jī)體內(nèi)分泌因素、環(huán)境改變及頸部放射線照射等因素都可引起甲狀腺癌的發(fā)病率上升。因甲狀腺癌晚期能采取的治療手段很有限，故而有

2、必要深入研究導(dǎo)致甲狀腺癌進(jìn)展的可能潛在的機(jī)制，為診療提供新的依據(jù)和思路。
　　上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在腫瘤研究中近年來(lái)較受關(guān)注，研究發(fā)現(xiàn)其既可發(fā)生于胚胎發(fā)育過(guò)程也能在某些病理因素的作用下發(fā)生，并在器官纖維化及腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等過(guò)程中發(fā)揮作用。上皮細(xì)胞基底面、游離面及側(cè)面都有顯著的功能結(jié)構(gòu)差異，即具有極性，如側(cè)面間存在的細(xì)胞連接，此類(lèi)特殊結(jié)構(gòu)可限制上皮細(xì)胞的異常遷移

3、也能協(xié)調(diào)功能發(fā)揮，EMT發(fā)生后，上皮細(xì)胞出現(xiàn)部分間質(zhì)細(xì)胞特點(diǎn)，這些轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞就失去極性及細(xì)胞連接等，獲得了遷移能力。同時(shí)驗(yàn)證EMT過(guò)程的兩個(gè)最重要的分子標(biāo)志E-cadherin與Vimentin的表達(dá)也可檢測(cè)到有所改變，即作為上皮標(biāo)志的E-cadherin的表達(dá)下調(diào)、作為間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物的Vimentin的表達(dá)有所上調(diào)。很多上皮來(lái)源的腫瘤發(fā)生EMT在遷襲轉(zhuǎn)移的早期，此過(guò)程有轉(zhuǎn)錄因子參與，調(diào)節(jié)眾多惡性腫瘤轉(zhuǎn)移所涉及到的基因表達(dá)，不同基因改

4、變所致腫瘤的生物學(xué)變化不盡相同，因此探究參與調(diào)節(jié)EMT的相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子為相當(dāng)可行的研究方向。
　　Stat5(signal transducer and activator of transcription5)是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子家族的成員，很多細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子的刺激都可引起Stat5的激活，其活化前大多位于細(xì)胞質(zhì)中，被激活之后轉(zhuǎn)位，進(jìn)入細(xì)胞核可參與調(diào)控下游一系列靶基因的表達(dá)；Stat5蛋白的過(guò)表達(dá)及異常激活均可以影響腫瘤的形

5、成及演進(jìn)，如在前列腺癌、乳腺癌、白血病、頭頸部鱗癌及肺癌等多種人類(lèi)惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)了其表達(dá)的異常，但Stat5在甲狀腺癌中表達(dá)情況及相關(guān)研究國(guó)內(nèi)外甚少。
　　目前有關(guān)Stat5與EMT相關(guān)分子標(biāo)志E-cadherin、Vimentin在甲狀腺癌中的表達(dá)情況及相互作用關(guān)系的研究尚未見(jiàn)有報(bào)道，本研究采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)126甲狀腺癌組織中Stat5及其激活形式磷酸化的Stat5(P-Stat5)與E-cadherin、Viment

6、in蛋白的表達(dá)情況，并結(jié)合臨床參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，旨在探討四者于甲狀腺癌的發(fā)生及演進(jìn)過(guò)程中所起的作用以及相互之間的關(guān)系，為甲狀腺癌的診斷及有效治療提供新思路及理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.免疫組織化學(xué)選用鏈霉卵白素-過(guò)氧化物酶(Streptavidin-Peroxidase，SP)法，檢測(cè)了所收集的2011-2015年間鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科中存檔的甲狀腺手術(shù)石蠟標(biāo)本，將通過(guò)4μm連續(xù)切片的標(biāo)本，收貼在粘附載玻片上，經(jīng)由

7、60℃烤箱烤片2h后進(jìn)行免疫組織化學(xué)處理，染色過(guò)程按照說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格進(jìn)行，采用DAB顯色。
　　2.所得數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理運(yùn)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，Stat5、P-Stat5、E-cadherin及 vimentin在甲狀腺癌及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中的陽(yáng)性率對(duì)比為定性資料比較，采用χ2檢驗(yàn)及連續(xù)性校正；四種蛋白在甲狀腺癌中表達(dá)的相關(guān)性分析采用多組二分類(lèi)變量的關(guān)聯(lián)分析，得出Pearson’s R值；檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P<0.05表示差異

8、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.Stat5、P-Stat5、Vimentin在甲狀腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為85.71％(108/126)、54.76%(69/126)、77.78%(98/126)，明顯高于其在結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中的表達(dá)26.09%(6/23)、13.04%(3/23)、8.70%(2/23)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=38.477、χ2=13.556、χ2=38.983，皆有P<0.05)；E-cadhe

9、rin在甲狀腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為25.40%(32/126)，明顯低于結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中的表達(dá)86.96%(20/23)，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=29.789，P<0.05)。在甲狀腺癌的四種組織學(xué)分類(lèi)中， P-Stat5、Vimentin在乳頭狀癌中的陽(yáng)性表達(dá)率高于在濾泡癌、髓樣癌及未分化癌中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；E-cadherin在乳頭狀癌中的表達(dá)低于其余三種癌組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

10、
　　2.結(jié)合有關(guān)臨床病理參數(shù)后統(tǒng)計(jì)顯示 Stat5、P-Stat5、E-cadherin、Vimentin的表達(dá)與甲狀腺癌是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，而與甲狀腺癌患者的年齡、性別及腫瘤直徑大小無(wú)關(guān)；在有檢出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中Stat5、P-Stat5、E-cadherin、Vimentin的陽(yáng)性率分別為88.10%(37/42)、69.05%(29/42)、14.29%(6/42)、88.10%(37/42)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中三者的陽(yáng)

11、性率分別為84.52%(71/84)、47.62%(40/84)、72.62%(61/84)、30.95%(26/84)，P-Stat5、E-cadherin、Vimentin三者的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.678，χ2=4.105、χ2=3.880，皆有P<0.05)，Stat5在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)略高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.292， P>0.05)。
　　3.通過(guò)關(guān)聯(lián)分析結(jié)果示在甲狀腺癌中Stat5

12、與E-cadherin的表達(dá)之間關(guān)聯(lián)系數(shù)r=-0.335、二者呈負(fù)相關(guān)，Stat5與Vimentin的表達(dá)之間關(guān)聯(lián)系數(shù)r=0.218、二者呈正相關(guān)，E-cadherin、Vimentin的表達(dá)之間關(guān)聯(lián)系數(shù) r=-0.609、二者呈負(fù)相關(guān)，Stat5與P-Stat5表達(dá)的關(guān)聯(lián)系數(shù)r=0.176、二者呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.甲狀腺癌中存在Stat5、P-Stat5、Vimentin表達(dá)的升高，E-cadherin表達(dá)的下

13、調(diào)，提示Stat5可能參與甲狀腺癌的發(fā)生過(guò)程且甲狀腺癌中存在上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化。
　　2.P-Stat5、E-cadherin及Vimentin的表達(dá)可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理類(lèi)型有關(guān)，提示其參與甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展的過(guò)程。
　　3.Stat5和P-Stat5的表達(dá)與Vimentin的表達(dá)呈正相關(guān)、與E-cadherin呈負(fù)相關(guān)，Stat5、P-Stat5二者之間表達(dá)呈正相關(guān)，E-cadherin與Vimentin之間呈負(fù)相關(guān)，提示S