正電子核素標(biāo)記RGD肽的基礎(chǔ)研究.pdf

1、整合素對細(xì)胞的黏附、增殖、分化、轉(zhuǎn)移、凋亡有重要的調(diào)控作用，在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。整合素αvβ3在多種腫瘤細(xì)胞表面有過度表達(dá)，而RGD序列肽是整合素αvβ3的特異性配體。因此，將正電子核素標(biāo)記到具有RGD序列的肽類化合物上，合成RGD肽示蹤劑用于腫瘤受體顯像，對于腫瘤早期、高特異性定位、定量診斷具有重要意義。 本研究通過間接方法將18F標(biāo)記到單體肽c(RGDyK)和二聚體肽E[c(RGDyK)]2得到[18F]FB-c

2、(RGDyK)([18F]FB-RGD)和[18F]FB-E[c(RGDyK)]2([18F]FB-RGD2)。制備18F標(biāo)記RGD多肽分五步反應(yīng)：18F-F-生產(chǎn)，親核反應(yīng)，保護(hù)基團(tuán)的水解反應(yīng)，[18F]FBA與TSTU的連接反應(yīng)，以及最后[18F]SFB與RGD肽的連接反應(yīng)。其中，18F標(biāo)記試劑([18F]SFB)合成效率是RGD肽標(biāo)記的關(guān)鍵一步。因此，我們研究了影響[18F]SFB合成效率的因素。其中重點(diǎn)研究影響親核反應(yīng)和[18F

3、]FBA與TSTU連接反應(yīng)的因素。親核反應(yīng)時(shí)，用無水DMSO作第一標(biāo)記前體(TMA-OTS)的溶劑，115℃反應(yīng)10min，反應(yīng)效率更高；[18F]FBA與TSTU連接反應(yīng)時(shí)，100℃密閉加熱10min得到[18F]SFB，效率更高；在分離提純中間產(chǎn)物時(shí)我們選擇了C18柱固相分離提取的方法，結(jié)果放射化學(xué)純度都達(dá)到90％以上。將RGD肽加入到制備好的干燥[18F]SFB的無水DMSO溶液中，60℃加熱30min，梯度淋洗分離出RGD肽標(biāo)記

4、物，可以得到滿意的放射性化學(xué)純度和標(biāo)記率。在生理鹽水和胎牛血清(FBS)體系中兩種標(biāo)記物均有良好的穩(wěn)定性。 用荷Lewis肺癌C57BL/6N小鼠進(jìn)行生物分布實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示：兩種18F標(biāo)記RGD肽都有快速的腫瘤放射性攝取、高腫瘤放射性濃聚和較快的血清除。與[18F]FB-RGD相比，[18F]FB-RGD2腫瘤攝取速度快，腫瘤攝取時(shí)間長，小腸、肝臟的攝取顯著減少，但[18F]FB-RGD2比[18F]FB-RGD有較高放射性腎攝

5、取。預(yù)先注射單體RGD肽并分別注射兩種RGD肽標(biāo)記物1h后行受體阻斷實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：兩種肽標(biāo)記物均能夠與整合素αvβ3受體特異性結(jié)合，二聚體肽標(biāo)記物與整合素αvβ3受體親和力強(qiáng)于單體肽。選取[18F]FB-RGD2行PET顯像，并用[18F]FDG做顯像對照實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果表明：[18F]FB-RGD2能靶向作用于腫瘤組織，與[18F]FDG作顯像劑相比，其靈敏度更高，特異性更強(qiáng)，靶向性更好。 本研究為高效自動化合成[18F]SF