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1、從湖南瀏陽、桂陽、寧鄉(xiāng)、寧遠(yuǎn)、石門、龍山、鳳凰和云南玉溪、曲靖等赤星病病區(qū)采集植株下部的45張健康煙葉,分離到的676株煙草葉圍菌株。利用平板對峙法測定分離菌株對煙草赤星病菌的拮抗作用,結(jié)果表明,16株菌株對煙草赤星病菌有拮抗作用,其中菌株19,29對煙草赤星病菌的抑制帶在10.0 mm以上,且對病菌孢子的萌發(fā)也有抑制作用。經(jīng)形態(tài)和生理生化測定,19和29菌株分別被鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和短芽孢桿菌(B
2、acillus brevis)。 拮抗菌19和29菌株生長的最適pH值為7.0。19菌株的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為:豆餅粉25‰、魚粉3‰、CaCO<,3>4‰、KH<,2>PO<,4> 0.7‰,最佳發(fā)酵溫度為30℃,發(fā)酵時間26 h,接種量3%,在150 mL的三角瓶中裝80 mL培養(yǎng)基;菌株29的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基為:豆餅粉20‰、魚粉3‰、CaCO<,3>3‰、KH<,2>PO<,4>0.8‰,最佳發(fā)酵溫度28℃,發(fā)酵時間24 h,
3、接種量4%,在150mL的三角瓶中裝80 mL培養(yǎng)基。 19和29菌株的發(fā)酵液能誘導(dǎo)煙草體內(nèi)的抗性相關(guān)酶如過氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)酶活性的增加。 用利福平作葉面拮抗菌19和29菌株的抗性標(biāo)記,檢測19和29菌株在煙葉上定殖情況,結(jié)果表明,這兩株菌株可在煙葉上定殖。 19和29菌株對煙草赤星病的防治效果,離體試驗的平均防效分別為74.3%和78.0%,室內(nèi)試驗的平均防效分別為81.51%和79.7
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