煙草黑脛病菌、青枯病菌拮抗放線菌的篩選及控病研究.pdf

1、煙草是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物之一，近幾年來(lái)，重慶煙區(qū)以煙草黑脛病、青枯病發(fā)病最為嚴(yán)重，造成大量經(jīng)濟(jì)損失。在煙草病害的多種防治方法中，生物防治對(duì)煙葉生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展具有較好的應(yīng)用前景。放線菌是生防微生物的重要來(lái)源，在植物病害的生物防治中占有重要地位。本試驗(yàn)從采自我國(guó)幾大煙區(qū)的煙草根圍土壤中分離篩選出對(duì)煙草黑脛病、青枯病病原菌有拮抗效果的放線菌，進(jìn)行溫室控病研究及菌株的鑒定，并進(jìn)一步探討其生防控病機(jī)理。具體結(jié)果如下： 1、從重慶、貴州、

2、云南、河南、陜西、山東這幾個(gè)我國(guó)主要的煙草生產(chǎn)地區(qū)共采集煙草根圍土壤樣品57份。在高氏一號(hào)培養(yǎng)基上采用平板稀釋法分離獲得415株放線菌。 2、將分離獲得的415株放線菌分別采用平板對(duì)峙法和平板噴霧法對(duì)煙草黑脛病菌、煙草青桔病菌進(jìn)行初篩，得到有拮抗活性的菌株178株，占分離總數(shù)的42.9％。其中對(duì)煙草黑脛病菌有拮抗活性的菌株134株，占分離總數(shù)的32.3％。對(duì)煙草青枯病菌有拮抗活性的菌株77株，占分離總數(shù)的18.6％。而對(duì)兩種病害

3、均有拮抗作用的活性菌株為33株，占分離總數(shù)的7.95％。 3、對(duì)初篩拮抗半徑在10mm以上的煙草黑脛病菌拮抗菌以及初篩拮抗半徑在5mm以上的煙草青枯病菌拮抗放線菌菌株進(jìn)行復(fù)篩，測(cè)定單個(gè)菌株的平板抑菌效果。對(duì)煙草黑脛病菌抑菌帶寬在15～35mm拮抗菌共有11株菌株，其中菌株HLL3-4、BX2-5-4抑菌帶寬平均值為33.3mm和32mm；對(duì)煙草青枯病菌的抑菌圈直徑在35～55mm的活性菌株有7株，菌株GAS1-9和YYD3-32

4、抑菌圈直徑均在50mm以上。 4、溫室盆栽試驗(yàn)結(jié)果顯示，參試拮抗菌株發(fā)酵原液對(duì)兩種病害均有良好的防治效果。對(duì)煙草黑脛病的防治效果在38.13％～88.89％；相對(duì)防效50％以上的菌株8株，占總數(shù)的61.5％：防效在80％以上的菌株2株，菌株BX2-5-4的防治效果最好，達(dá)88.89％；其次為BX1-1，防效為88.13％。拮抗菌對(duì)煙草青枯病的防治效果在37.89％～90.06％；防效在60％以上的菌株有6個(gè)，占總數(shù)的85.7％。

5、相對(duì)防效最高的菌株為SXL1-7，防效90.06％；其次為菌株GAS1-9，相對(duì)防效為85.72％。 5、通過(guò)形態(tài)和培養(yǎng)特征的觀察、生理生化的測(cè)定對(duì)平板抑菌和溫室控病篩選出的13株拮抗菌進(jìn)行分類鑒定，初步認(rèn)為13株拮抗菌均為放線菌，其中鏈霉菌屬(Streptromyces)6株，包括白孢類群、綠色類群、黃色類群和粉紅孢類群弗氏亞群；鏈輪絲菌屬(Streptroverticillium)3株；糖單孢菌屬(Saccharomonos

6、pora)1株；鞘孢囊菌屬(Elytrosporangium)1株；孢囊放線菌屬(Actinosporangium)1株。另外對(duì)5株溫室防效較好的菌株更深入的進(jìn)行了16S rDNA序列及系統(tǒng)發(fā)育分析，結(jié)合其形態(tài)學(xué)及生理生化特性，確定菌株的分類地位。結(jié)果表明：菌株GAS1-9為婁徹氏鏈霉菌(Streptromyces rochei)；BX1-1為變異鏈霉菌(Streptromycesvariabilis)；BX2-5-4為吸水鏈霉菌(St