濕地植物提取物對病原菌的抑制作用.pdf

1、抗生素的發(fā)現(xiàn)和使用是人類在醫(yī)藥領(lǐng)域取得的偉大成就之一，它對人類健康和生命安全起到了極其重要的保障作用，也對養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展起到了積極的推動作用。但近年來養(yǎng)殖業(yè)在抗生素使用過程中對其用量、用藥次數(shù)、停藥期的忽視導(dǎo)致農(nóng)副產(chǎn)品中藥物殘留等問題日益突出。而人類因直接使用抗生素或攝入食物中殘留的抗生素，導(dǎo)致抗生素在其體內(nèi)富集引起毒理效應(yīng)、導(dǎo)致病源菌產(chǎn)生耐藥性使藥效降低等問題也日趨嚴(yán)重。為了解決抗生素帶來的這些問題，尋找新的、天然的、能夠替代抗生素

2、控制傳染性疾病的藥物成為當(dāng)務(wù)之急。濕地植物由于其生活環(huán)境的特殊性，在抵抗病原微生物等方面可能具有獨特的作用，因此本研究選用濕地植物蘆葦(Phragmites australias)、空心蓮子草(AlternantheraPhiloxeroides)、鳳眼藍（Eichhornia crassipes）、荷（Nelumbo nucifera）、菱（Trapa bispinosa）、苦草（Vallisneria natans）、芡實（Eury

3、ale ferox）、辣蓼（Polygonum hydropiper）、酸模葉蓼(P.lapathifolium)、愉悅蓼(P.jucundum)、菖蒲(Acorus calamus)、菹草(Potamogetoncrispus)、馬來眼子菜（P.malaianus）、槐葉蘋（Salvinia natans）、金魚藻（Ceratophyllumdemersum）、鴨舌草(Monochoria vaginalis)、黑藻（Hydrill

4、verticillat）、水鱉（Hydrocharisdubia）、水芹（Oenanthe javanica）、芙蓉蓮（Pisitia stratiotes）、蒲公英（Taraxacummongolicum）、鴨跖草（Commelina communis)、龍葵（Solanum nigrum）、金錢草(Lysimachiachristinae)、茜草（Rubia cordifolia）、繁縷(Stellaria media)、黃花酢漿草

5、（Oxalispescaprae）、茭白（Zizania latifolia）、馬齒莧(Portulaca oleracea)、揚子毛茛（Ranunculus sieboldii水蜈蚣（Kyllinga brevifolia）、牛筋草(Eleusine indica)、活血丹（Glechoma longituba）、節(jié)節(jié)草（Equisetum ramosissimum）、綬草(Spiranthes sinensis)、看麥娘(Alope

6、curus aequalis)共36種植物，采用水提取、乙醇提取法提取有效成分，確定它們對金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大腸桿菌（Escherichia coli）、銅綠假單胞菌（Pseudomonasaeruginosa）、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)、嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)、溫和氣單胞菌(Aeromonas aeruginosa)、副溶

7、血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）7種細菌的抑菌活性，并從中篩選具有較強抑菌作用的植物提取物，進一步采用不同的溶劑萃取分離，選出抑菌能力最強的萃取物，將其添加至克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）飼料中，觀察萃取物對克氏原螯蝦存活率及非特異性免疫力的影響，為開發(fā)有效控制細菌性疾病的植物藥物以及天然的植物飼料添加劑提供資料。主要研究結(jié)果如下:
　　1.菱、芡實、辣蓼、龍葵、茜草、綬草、揚子毛茛7

8、種植物的乙醇提取物對大腸桿菌有一定的抑制作用;菱、芡實、辣蓼、芙蓉蓮、龍葵、茜草、綬草、揚子毛茛8種植物的乙醇提取物對金黃色葡萄球菌有一定的抑制作用;菱、芡實、龍葵、茜草4種植物的乙醇提取物對沙門氏菌有一定的抑制作用;菱、芡實、辣蓼、龍葵、茜草、揚子毛茛6種植物的乙醇提取物對銅綠假單胞菌有一定的抑制作用;空心蓮子草、菱、鴨舌草、龍葵、茜草、馬齒莧、綬草、揚子毛茛、活血丹、金魚藻、芙蓉蓮、金錢草12種植物的乙醇提取物對嗜水氣單胞菌有抑制作

9、用;空心蓮子草、菱、龍葵、茜草、綬草、金錢草、活血丹、馬齒莧、揚子毛茛、辣蓼10種植物的乙醇提取物對溫和氣單胞菌有一定的抑菌作用;空心蓮子草、菱、龍葵、茜草、馬齒莧、揚子毛茛、活血丹、金錢草8種植物的乙醇提取物對副溶血弧菌有抑菌作用。
　　2.植物水提物的抑菌作用明顯小于植物醇提物的抑菌作用。綬草水提物濃度在濃度200 mg/mL時對大腸桿菌有抑菌作用，其抑菌圈直徑為12.38 mm;空心蓮子草、芡實、龍葵、綬草、繁縷、蒲公英6種

10、植物的水提物對嗜水氣單胞菌有抑菌作用;空心蓮子草、鴨舌草、綬草、龍葵、蒲公英、繁縷、活血丹7種植物的水提物對溫和氣單胞菌有抑菌作用;空心蓮子草、菱、綬草、龍葵、繁縷、活血丹6種植物的水提物對副溶血弧菌有抑菌作用。
　　3.菱、茜草、芡實、龍葵4種植物的乙醇提取物均對7種細菌具有較好的抑菌性，將其醇提物采用不同溶劑進行萃取，發(fā)現(xiàn)菱乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物的抑菌效果明顯，在其濃度為200 mg/mL時對金黃色葡萄球菌的抑菌直徑為26

11、.38 mm，對副溶血弧菌的抑菌直徑為27mm，而1.00％氯霉素對金黃色葡萄球菌的抑菌直徑為25.73 mm，對副溶血弧菌的抑菌直徑為25.25 mm，菱乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物的抑菌效果明顯高于1.00％氯霉素的抑菌效果。
　　4.對克氏原螯蝦飼喂不同添加劑的飼料15天后，菱乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物組動物的血清總蛋白的含量、血清堿性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性顯著高于對照組動物和1.00％氯霉素組動物。菱乙醇提取物的乙酸乙酯萃

12、取物作為飼料添加劑可以明顯提高克氏原螯蝦的存活率。
　　以上結(jié)果說明，不同提取方法獲得的有效成分對各類細菌的抑菌作用表現(xiàn)出異質(zhì)性，醇提物的抑菌性能要高于水提物的抑菌性;菱、芡實、辣蓼、水芙蓉、龍葵、茜草、綬草、揚子毛茛、空心蓮子草、鴨舌草、馬齒莧、活血丹、金魚藻、蒲公英、繁縷、金錢草16種植物的醇提物對7種菌有不同程度的抑菌效果;菱乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物對7種菌都有顯著的抑菌活性，它可提高動物血清中總蛋白的含量、血清堿性磷酸酶