龍葵提取物澳洲茄堿對肺癌細胞的抑制作用研究.pdf

1、龍葵分布廣泛,是藥食兩用植物。他營養(yǎng)成分高,可食用;也有較好的藥用價值,是一種常用于治療腫瘤的中藥;龍葵還具有分布廣泛、炮制工藝簡單、價格便宜、使用方便等優(yōu)點。龍葵全草均可入藥,其生物活性成分主要包括甾體類生物堿、多糖、維生素A和維生素C等;其中,甾體類生物堿中澳洲茄堿(Solasonine)和澳洲茄邊堿(Solamargine)是龍葵的主要活性成分,它們水解后苷元是澳洲茄胺(Solasodine),具有抗腫瘤活性,因此龍葵被列為十大抗

2、腫瘤中草藥之一,是一種具有良好藥用前景的治療腫瘤天然藥物。
　　人肺腺癌細胞A549和小鼠Lewis肺癌細胞(Lewis Lung Carcinomas,llc)作為肺癌的細胞模型在肺毒理學的體外研究和抗癌作用的研究中得到廣泛使用,已成為抗肺癌研究的重點領(lǐng)域之一。
　　本研究采用MTT法檢測了龍葵提取物澳洲茄堿對人類肺癌細胞株A549及小鼠lewis肺癌細胞株LLC的抑制效果;以稍高半致死劑量的澳洲茄堿分別處理兩種肺癌細胞,

3、并進行了細胞形態(tài)學觀察;以稍高半致死劑量的澳洲茄堿處理A549細胞,并進行了AnnexinV/PI雙染流式細胞分析和熒光定量PCR分析p53通路的下游因子Puma基因的表達;最后,采用MTT法比較了澳洲茄堿與其水解苷元澳洲茄胺(solasodine)之間在相同的實驗條件下,抑制相同的兩種肺癌細胞的藥效作用。
　　結(jié)果表明,澳洲茄堿對A549和LLC肺癌細胞均有明顯的抑制作用,澳洲茄堿對兩種肺癌的抑制作用基本上呈現(xiàn)與濃度成正比的趨勢

4、,并得出澳洲茄堿對A549和LLC的24小時IC50值分別為約18和20μg/mL;細胞形態(tài)學觀察表明以終濃度為20μg/mL澳洲茄堿處理的A549細胞大多呈現(xiàn)細胞膜皺縮樣的垂死形態(tài);annexinV/PI流式細胞分析結(jié)果表明以20μg/mL澳洲茄堿處理24小時的細胞的總死亡率為42.43％((Q2+Q3)/(Q2+Q3+Q4)),其中,早期凋亡細胞占總死亡細胞約22.08%(Q3/(Q2+Q3)),晚期凋亡或晚期凋亡和壞死細胞約占77

5、.92%(Q2/(Q2+Q3));SYBR綠色熒光定量PCR數(shù)據(jù)顯示,澳洲茄堿的處理顯著提高了A549癌細胞中p53通路的下游因子Puma基因的表達水平;澳洲茄胺對A549和LLC肺癌細胞均有明顯的抑制作用,其抑制作用基本上呈現(xiàn)與濃度成正比的趨勢,并得出澳洲茄胺對A549和LLC的24小時IC50值均約為7.5μg/mL。
　　研究表明,澳洲茄堿能明顯抑制肺癌細胞的生長,其方式主要是誘發(fā)細胞凋亡或細胞凋亡和細胞壞死,并且與p53通