5-羥色胺及其受體對皮層癲癇樣放電的調(diào)節(jié).pdf

1、背景:5*羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT,血清素）作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)重要的遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)，對皮層網(wǎng)絡(luò)活動(dòng)及動(dòng)物行為起著重要的調(diào)節(jié)作用。離體腦片研究證實(shí)5-HT對神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)興奮性有顯著影響，同時(shí)癲癇動(dòng)物模型腦內(nèi)5-HT含量及其相關(guān)受體密度有明顯改變。進(jìn)一步的動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，提高腦內(nèi)的5-HT濃度，可以提高癲癇發(fā)作的閾值，而降低腦內(nèi)5-HT濃度，會(huì)促進(jìn)各種實(shí)驗(yàn)性癲癇發(fā)作。提示5-HT對癲癇發(fā)作具有明顯的調(diào)節(jié)作用，但其作用機(jī)制

2、尚不明確。
　　目的:本研究利用15-18天Sprague-Dawley(SD)大鼠、野生型Swiss-Webster小鼠、5-HT1A受體基因敲除小鼠制作離體腦片癲癇模型，同時(shí)借助全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)及胞外場電位記錄技術(shù)，探索5-HT及5-HT1A，5-HT2A受體對內(nèi)嗅*海馬皮層(entorhinal-hippocampal cortex, EC-Hp)癲癇樣放電的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:1、制備離體EC*Hp腦片。2、全細(xì)胞

3、膜片鉗技術(shù)記錄內(nèi)嗅皮層第Ⅴ層錐體細(xì)胞膜電位，灌流5-HT(20μM)，觀察其對細(xì)胞膜電位的影響。3、使用印防己毒素(Picrotoxin, PTX)及高鉀人工腦脊液灌流離體腦片，誘導(dǎo)EC-Hp癲癇樣放電，并通過全細(xì)胞膜片鉗及場電位技術(shù)進(jìn)行記錄。在灌流液中分別加入5-HT及5-HT1A，5-HT2A受體激動(dòng)劑、阻斷劑，同時(shí)利用5-HT1A受體基因敲除小鼠腦片，探討5-HT對EC-Hp癲癇樣放電的調(diào)節(jié)作用，以及5-HT1A、5*HT2A受體

4、在其中的作用。
　　結(jié)果:1、5-HT(20μM)對內(nèi)嗅皮層第Ⅴ層錐體細(xì)胞的膜電位有顯著影響，可分為以下3種:①超極化(40％);②短暫去極化后超極化(26.67％);③去極化(33.34％)。
　　2、PTX及高鉀人工腦脊液灌流大鼠或小鼠腦片可誘導(dǎo)兩種類型的穩(wěn)定癲癇樣放電，全細(xì)胞膜片鉗及場電位記錄結(jié)果完全同步。
　　3、5-HT(20μM)可以顯著抑制EC-Hp癲癇樣放電，這種抑制作用可以被5-HT1A受體阻斷劑WA

5、Y-100635完全阻斷。
　　4、對于5-HT1A受體基因敲除小鼠EC-Hp的癲癇樣放電，5-HT(20μM)可以顯著延長單次發(fā)放的時(shí)間，從而增強(qiáng)癲癇樣放電，而這種作用可以被5-HT2A受體激動(dòng)劑TCB-2模擬，并被阻斷劑5-HT2A受體阻斷劑Ketanserin完全阻斷。
　　結(jié)論:1、5-HT可影響內(nèi)嗅皮層第Ⅴ層錐體細(xì)胞的興奮性。2、5-HT可以明顯抑制大鼠（和小鼠）EC-Hp癲癇樣放電，這是5-HT1A和5-HT2A