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1、攝食是一種復(fù)雜的行為活動,是多種神經(jīng)遞質(zhì)和調(diào)質(zhì)在下丘腦的廣泛區(qū)域互作的結(jié)果。5-HT是一種經(jīng)典的神經(jīng)遞質(zhì),具有廣泛的生物學(xué)功能,參與對攝食等功能的調(diào)節(jié)。有關(guān)5-HT的攝食調(diào)節(jié)作用,在哺乳動物中有一些報道,但在禽類中的報道較少。本研究以櫻桃谷鴨為試驗動物,采用免疫組化SABC法,從形態(tài)學(xué)上探討了5-HT對鴨的攝食調(diào)節(jié)作用機(jī)理。主要研究工作和結(jié)果如下: 1能量條件對鴨下丘腦中5-HT、NPY能神經(jīng)元的影響為了探討5-HT是否也參與禽
2、類的攝食和能量代謝的調(diào)節(jié),以及5-HT和NPY對攝食調(diào)節(jié)的相互作用,本研究選用來自同一父母代的1日齡健康櫻桃谷鴨60羽為試驗動物,將其隨機(jī)分為兩組,分別飼喂高能和低能日糧,飼養(yǎng)5w后,開始處理動物。將鴨灌流固定后,取下丘腦制作石蠟連續(xù)橫切片(厚6μm)。采用免疫組化鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法(Streptavidin-biotin-peroxidasecomplexmethod,SABC)進(jìn)行染色,并用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量
3、分析。結(jié)果顯示:高能組室旁核(17.73±1.41個/19.46×103μm2)及腹內(nèi)側(cè)核(15.80±1.71個/19.46×103μm2)有大量的5-HT陽性胞體,低能組外側(cè)區(qū)(11.25±1.53個/19.46×103μm2)也有大量的5-HT陽性胞體;高能組和低能組下丘腦室旁核、視上核及外側(cè)區(qū)均有NPY能陽性神經(jīng)元分布,低能組下丘腦外側(cè)區(qū)和視上核的陽性神經(jīng)元的平均積分光度顯著高于高能組(p<0.01),室旁核中陽性神經(jīng)元的平均積
4、分光度差異不顯著。這一研究結(jié)果表明:禽類下丘腦中5-HT能神經(jīng)元參與攝食和能量代謝的調(diào)節(jié);禽類下丘腦中NPY對攝食調(diào)節(jié)作用部位可能位于下丘腦外側(cè)區(qū)與視上核,與哺乳動物的攝食調(diào)節(jié)通路存在差異;5-HT可能通過抑制下丘腦外側(cè)區(qū)NPY的功能而發(fā)揮抑制攝食作用。 2色氨酸對鴨攝食的影響色氨酸是機(jī)體的必需氨基酸,同時也是5-HT合成的前體物質(zhì)。為了探討過量的色氨酸是否對鴨產(chǎn)生抑制攝食作用,本研究選用健康櫻桃谷鴨為試驗動物,禁食4h(8:0
5、0am-12:00am)后,腹腔注射不同劑量的色氨酸,1h后飼喂事先稱重的飼料,并在飼喂1h,2h,4h后分別測定禁食鴨的采食量。結(jié)果顯示:對照組在飼喂1h,2h,4h后的采食量分別為67.20±0.91g/kg,80.74±2.92g/kg和87.15±2.53g/kg,100mg/kg,200mg/kg和300mg/kg組的采食量隨著劑量的增加而減少,注射組比對照組的采食量顯著減少(p<0.01)。這一研究結(jié)果表明,通過外周注射過量
6、的色氨酸,可明顯抑制鴨攝食,并且呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)。 3色氨酸對鴨腦干中5-HT和NPY的影響為了探討過量的色氨酸是如何發(fā)揮抑制攝食作用的,本研究以櫻桃谷鴨為試驗動物,從腹腔注射不同劑量的色氨酸,采用免疫組化SABC法,研究5-HT及NPY在鴨腦干中的分布情況,并用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量研究,為闡明5-HT對鴨的攝食調(diào)節(jié)作用機(jī)理提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。結(jié)果顯示:不同色氨酸注射組中,5-HT能神經(jīng)元在下丘腦室旁核、中腦線形核、腳間核、滑車神
7、經(jīng)核、被蓋腹側(cè)核、腦橋中縫核、藍(lán)斑核、橋內(nèi)側(cè)核、橋外側(cè)核、延髓中縫核、迷走神經(jīng)運動核、舌下神經(jīng)核、疑核和網(wǎng)狀核中都有分布。100mg/kg和200mg/kg組中腦線形核、腳間核、腦橋中縫核、橋內(nèi)側(cè)核、橋外側(cè)核及藍(lán)斑核中陽性神經(jīng)元平均積分光度顯著高于0mg/kg組(p<0.01)。NPY能神經(jīng)元在下丘腦室旁核、視上核、下丘腦外側(cè)區(qū)、藍(lán)斑核、中縫核、橋內(nèi)側(cè)核、橋外側(cè)核、網(wǎng)狀核和迷走神經(jīng)運動核中分布。100mg/kg和200mg/kg組室旁核
8、和中縫核中NPY陽性神經(jīng)元平均積分光度顯著高于0mg/kg組(p<0.01),0mg/kg組下丘腦外側(cè)區(qū)及藍(lán)斑核中NPY陽性神經(jīng)元平均積分光度顯著高于100mg/kg和200mg/kg組(p<0.01)。這一研究結(jié)果表明:色氨酸可能被藍(lán)斑核、中縫核、腳間核及橋核中5-HT能神經(jīng)元吸收用于5-HT的生物合成,這些核團(tuán)通過其廣泛的纖維聯(lián)系,影響NPY等其它攝食相關(guān)因子而發(fā)揮對攝食的調(diào)節(jié)作用。 4色氨酸對鴨小腦中5-HT和NPY的影響
9、對大鼠的研究發(fā)現(xiàn),小腦除了參與對運動的精細(xì)調(diào)節(jié)外,還可能參與對攝食行為的調(diào)節(jié)。為了探討鴨小腦是否也參與對攝食行為的調(diào)節(jié),本研究以櫻桃谷鴨為試驗動物,從腹腔注射不同劑量的色氨酸,采用免疫組化SABC法,研究5-HT及NPY在鴨小惱中的分布情況,并用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量研究,為闡明鴨小腦的攝食調(diào)節(jié)作用提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。結(jié)果顯示:5-HT能神經(jīng)元在小腦皮質(zhì)的Purkinje細(xì)胞層中分布,200mg/kg組陽性神經(jīng)元的平均積分光度顯著高于100
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