中藥補腎助孕湯對人子宮內(nèi)膜細胞體外培養(yǎng)的影響.pdf

1、目的：
　　 本課題旨在通過對人子宮內(nèi)膜細胞的原代和傳代培養(yǎng)，觀察實驗組（即加藥組）與對照組子宮內(nèi)膜細胞的的鏡下形態(tài)，繪制生長曲線，和檢測細胞因子白血病抑制因子(leukaemia inhibitory factor，LIF)、表皮生長因子(epidermal growthfactor，EGF)、降鈣素(calcitionin，CT)的表達的差異，探討中藥補腎助孕湯對人子宮內(nèi)膜細胞體外培養(yǎng)影響。
　　 方法：
　　

2、 取新鮮人子宮內(nèi)膜標(biāo)本體外分離培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)并觀察其生長狀況和細胞形態(tài)，鑒別其所含細胞種類。將中藥方劑補腎助孕湯用基礎(chǔ)培養(yǎng)液按不同倍數(shù)稀釋制成培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)子宮內(nèi)膜細胞，與未添加中藥的等量對照組相比，通過鏡下觀察細胞形態(tài)和描繪生長曲線觀察其成長狀況及應(yīng)用免疫組化方法比較子宮內(nèi)膜細胞LIF、EGF、CT的表達差異。
　　 結(jié)果：
　　 子宮內(nèi)膜細胞經(jīng)過體外分離培養(yǎng)后傳代培養(yǎng)成功，細胞經(jīng)角蛋白和波形蛋白鑒定提示人子宮內(nèi)膜

3、細胞體外培養(yǎng)包括基質(zhì)細胞和腺上皮細胞，中藥補腎助孕湯經(jīng)過過濾、篩選，加入培養(yǎng)基。子宮內(nèi)膜細胞加入含最適濃度中藥的培養(yǎng)基后，繼續(xù)進行細胞培養(yǎng)，與對照組相比，實驗組細胞鏡下觀察其生長狀況良好，細胞形態(tài)飽滿，生長曲線對數(shù)生長期陡峭，傳代時細胞個數(shù)增加，即補腎助孕湯可以促進人子宮內(nèi)膜細胞在體外增殖。免疫組化顯示加中藥組的子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞和腺上皮細胞的LIF因子（192.9031±14.5342 vs183.1568±9.1891，P＜0.001

4、，t=5.35）表達較對照組增加，有統(tǒng)計學(xué)差異;加中藥組子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞和腺上皮細胞的EGF因子（196.4798±2.9071 vs184.5064±3.7335，P＜0.001，t=26.1）表達相對于對照組增強，有統(tǒng)計學(xué)差異;加中藥組子宮內(nèi)膜腺上皮細胞的CT因子（183.1856±8.4227vs176.4184±0.4480，P＜0.005，t=7.45）的表達相對于對照組也增強，有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 結(jié)論：