肝細胞生長因子對體外培養(yǎng)的人子宮內膜細胞增殖及子宮內膜容受性的影響.pdf_第1頁
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1、中國醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學位論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得我?;蚱渌逃龣C構的學位或證書而使用過的材料,與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處,本人承擔一切相關責任。,論文作者簽名:二瞬日期:——超出』【一中國

2、醫(yī)科大學研究生學位論文版權使用授權書本人完全了解中國醫(yī)科大學有關保護知識產權的規(guī)定,即:研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產權單位屬中國醫(yī)科大學。本人保證畢業(yè)離校后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學,且導師為通訊作者,通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學。學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。學校可以公布學位論文的全部或部分內容(保密內容除外),以采用影印、縮印或其他手段保存論文。

3、論文作者簽名:指導教師簽名:日期:坌:!!:£!篁中文論著摘要I㈣舢Jfff|f|f『fⅢ舢刪ffJf冊fY189276”8”肝細胞生長因子對體外培養(yǎng)的人子宮內膜細胞增殖及子宮內膜容受性的影響目的。觀察肝細胞生長因子對體外培養(yǎng)的人子宮內膜腺上皮細胞的影響及其最佳劑量,并檢測該因子對子宮內膜細胞白血病抑制因子、整合素aVl33表達的影響,以獲得高產量的純化的子宮內膜腺上皮及基質細胞的分離培養(yǎng)方法,為以后在體外重建人子宮內膜三維模型,為輔助

4、生殖技術中如何提高子宮內膜容受性提供理論依據(jù)。方法留取中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院2009年10月2010年12月因子宮肌瘤行子宮全切或部分切除的病人的子宮內膜(增生期),年齡2548歲,無內科合并癥,月經周期規(guī)律(2535天),術前三個月無激素治療史。病理證實子宮內膜無病變,留取子宮內膜標本得到本院倫理委員會的批準,征得患者本人同意并簽定知情同意書。子宮內膜離體后,放入分離培養(yǎng)基中(DMEMH溶液,含5%胎牛血清,抗生素),迅速送回實驗室

5、。消化后篩網(wǎng)分離培養(yǎng)人子宮內膜腺上皮細胞及間質細胞,利用其不同貼壁時間進行純化,培養(yǎng)35天,取對數(shù)生長期的細胞,用含025%的胰酶消化,懸浮于適量培養(yǎng)基中,通過細胞計數(shù)將其調整到4“104細胞/ml,將無菌玻片放入6孔培養(yǎng)皿中進行細胞爬片培養(yǎng),用MTT法檢測肝細胞生長因子對腺上皮細胞的增殖影響,并用免疫組化方法檢測白血病抑制因子,整合素aVl33的表達。多士里當日7R肝細胞生長因子能促進體外培養(yǎng)的腺上皮細胞增殖,在濃度為20ng/ml時

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