山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng).pdf

1、本研究對山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，探討山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的分離與體外培養(yǎng)條件、生長特點(diǎn)及其增殖過程。試驗(yàn)采用不同的消化方法獲取山羊子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞，通過原代培養(yǎng)、免疫組織化學(xué)鑒定、傳代培養(yǎng)、生長曲線測定、細(xì)胞凍存等試驗(yàn)，觀察山羊子宮內(nèi)膜細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中的生長特性，并找出細(xì)胞傳代最佳密度、凍存的最佳方法。結(jié)果表明： 1.在37℃條件下，采用2g/L的膠原酶I消化3～4h效果最好，細(xì)胞懸液粘稠度小，腺團(tuán)較大，腺團(tuán)與單個(gè)

2、細(xì)胞易分離。經(jīng)200目濾網(wǎng)過濾－低速離心－沉淀三個(gè)步驟分離懸液中的單個(gè)細(xì)胞，得到的細(xì)胞量大，而且純凈。 2.細(xì)胞在培養(yǎng)0.5h左右開始貼壁，在培養(yǎng)過程中逐漸呈現(xiàn)多角形和紡錘形，細(xì)胞核呈卵圓形，3-4d即鋪成單層，細(xì)胞間存在重疊生長現(xiàn)象；利用免疫組織化學(xué)染色法做鑒定，2種形態(tài)的細(xì)胞均表達(dá)波形蛋白，陽性率可達(dá)95％以上，不表達(dá)角蛋白，證明所得到的細(xì)胞為子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞。 3.傳代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞以1×105/mL的密度接種，