DR4、DR5基因甲基化對(duì)膀胱癌TRAIL耐受的影響研究.pdf

1、目的：(1)闡明膀胱癌細(xì)胞DR4、DR5基因甲基化狀態(tài)與DR4、DR5表達(dá)的關(guān)系；(2)研究膀胱癌細(xì)胞TRAIL耐受與DR4、DR5基因甲基化狀態(tài)的關(guān)系。
　　 方法：采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)膀胱癌T24細(xì)胞、BIU87細(xì)胞表面DR4、DR5 mRNA表達(dá)，對(duì)低表達(dá)或無(wú)表達(dá)DR4、DR5膀胱癌細(xì)胞采用甲基化特異性PCR(MSP)技術(shù)檢測(cè)DR4、DR5啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)。同時(shí)應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)TRAIL組以及TRAIL+5-氮雜胞苷

2、組細(xì)胞凋亡狀態(tài)。
　　 結(jié)果：RT-PCR研究發(fā)現(xiàn)：膀胱癌T24細(xì)胞無(wú)DR4、DR5表達(dá)，MSP法研究顯示：DR4、DR5基因呈甲基化狀態(tài)，對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的凋亡表現(xiàn)為耐受狀態(tài)(100ng/mlTRAIL，凋亡率7.6％)，經(jīng)去甲基化試劑5-氮雜胞苷處理，T24細(xì)胞DR4、DR5表達(dá)隨處理時(shí)間而增加，100ng/mlTRAIL凋亡率達(dá)29.2％；BIU-87細(xì)胞表達(dá)DR4，DR5并對(duì)TRAIL敏感(100ng/mlTRAIL凋亡