膀胱癌TCF21基因甲基化與臨床意義.pdf

1、目的:膀胱癌是一種常見的惡性腫瘤,全球每年約15萬人死亡。迄今仍然沒有分子靶向藥物被批準(zhǔn)用于該疾病治療。TCF21(Transcription Factor21)是編碼轉(zhuǎn)錄因子21的基因,也是腫瘤抑制基因。TCF21基因甲基化在頭頸部癌、肺癌和腎癌上已有報道,然而在膀胱癌上TCF21基因甲基化表征及其臨床意義尚未得到充分的揭示,尤其是TCF21基因甲基化定量檢測在膀胱癌中未見報道。本研究探討TCF21基因甲基化與表達(dá)的相互關(guān)系,以及 T

2、CF21基因甲基化在膀胱癌中的表征,目的在于證明對膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化定量檢測,可以成為膀胱癌診斷和預(yù)后的重要手段之一。
　　方法:選擇膀胱癌細(xì)胞株5637進(jìn)行體外實驗,用去甲基化試劑Decitabine和Zebularine處理膀胱癌細(xì)胞株5637,采用焦磷酸測序技術(shù)定量檢測膀胱癌細(xì)胞株5637中 TCF21基因甲基化水平,分別采用雙標(biāo)記熒光探針技術(shù)和Western-blot方法檢測膀胱癌細(xì)胞株5637中TCF

3、21 mRNA和蛋白水平;采用焦磷酸測序技術(shù)定量檢測83例膀胱癌組織和19例正常膀胱組織中TCF21基因甲基化水平,采用 Mann-Whitney U Test統(tǒng)計方法分析、比較在膀胱癌組織中TCF21基因甲基化水平在患者性別、年齡、吸煙史、腫瘤分級和分期五個臨床參數(shù)上的差異,采用Spearman Correlation統(tǒng)計方法分析在膀胱癌組織中TCF21基因甲基化水平與患者年齡、腫瘤分級和分期三個臨床參數(shù)的相關(guān)性;采用焦磷酸測序技術(shù)定

4、量檢測33例膀胱癌尿脫落細(xì)胞和10例健康人群尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化水平,采用Mann-Whitney U Test統(tǒng)計方法分析、比較在膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化水平在患者性別、年齡、吸煙史、腫瘤分級和分期五個臨床參數(shù)上的差異,采用Spearman Correlation統(tǒng)計方法分析在膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化水平與患者年齡、腫瘤分級和分期三個臨床參數(shù)的相關(guān)性,采用受試者工作特征(ROC)曲線方法對比膀胱

5、癌組織和膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化水平對診斷的潛在能力。
　　結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)用去甲基化試劑 Decitabine和 Zebularine處理膀胱癌細(xì)胞株5637后,導(dǎo)致TCF21基因甲基化水平降低,TCF21 mRNA和蛋白表達(dá)增加;與此同時,在膀胱癌組織中TCF21甲基化水平高于正常膀胱組織,在膀胱癌組織中TCF21甲基化水平高于腎癌組織,患者年齡對在膀胱癌組織中TCF21基因甲基化水平存在差異;在膀胱癌尿脫落細(xì)胞

6、中TCF21甲基化水平高于健康人群尿脫落細(xì)胞,患者腫瘤分級對在膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化水平存在差異,患者腫瘤分級與在膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21基因甲基化水平相關(guān),在膀胱癌組織和膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21的ROC曲線下面積均高于參考值,但在膀胱癌尿脫落細(xì)胞中TCF21特異性高于膀胱癌組織。
　　結(jié)論:本研究證明TCF21基因CpG島的異常甲基化在調(diào)節(jié)TCF21基因的表達(dá)中起重要作用;TCF21基因可以作為是膀胱癌診