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文檔簡介
1、目的:
建立大鼠血漿中葛根素 (Puerarin) 濃度的高效液相色譜(HPLC)測定法,觀察葛根素在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)過程以及小檗堿對大鼠體內(nèi)葛根素藥動學(xué)的影響,并計算相應(yīng)的藥動學(xué)參數(shù),探討兩藥合用后葛根素在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)變化情況。
方法:
血漿樣品采用6%高氯酸沉淀蛋白,15000 r·min-1高速離心后進行檢測。色譜柱為Hypersil ODS(4.6 mm×150 mm,5μm),流動
2、相為甲醇-0.0043mol·L-1磷酸二氫鉀緩沖液(pH2.7)(22:78),流速為0.8 mL·min-1,柱溫為30 ℃,檢測波長250 nm,進樣量為20 μL。大鼠灌胃給予葛根素混懸液(100 mg·kg-1)及葛根素和小檗堿混合液(100 mg·kg-1+50 mg·kg-1、100 mg·kg-1+100 mg·kg-1、100 mg·kg-1+200 mg·kg-1),用HPLC法測定大鼠給藥后不同時間血漿葛根素的濃度
3、,所得藥物濃度-時間數(shù)據(jù)用DAS 2.1.1程序處理,進行自動房室模型判別及藥動學(xué)參數(shù)計算,并對單獨用藥組及聯(lián)合用藥組進行比較。
結(jié)果:
1.葛根素的標(biāo)準(zhǔn)血藥濃度的線性范圍為 0.10~10.00 mg·L-1,回歸方程為A=2.7019×104 C+2495.8,r=0.999 5,葛根素的最低檢測限(LLOD)為0.05mg·L-1 (S/N>3);高、中、低三種濃度的日內(nèi)、日間精密度RSD分別小于2.1
4、1%和2.79%;方法回收率為96.64%~112.55%。
2.合用小檗堿前后,葛根素混懸液組(100 mg·kg-1)及葛根素和小檗堿混合液組(100 mg·kg-1+50 mg·kg-1、100 mg·kg-1+100 mg·kg-1、100 mg·kg-1+200 mg·kg-1) 四組中葛根素的主要藥動學(xué)參數(shù)Cmax 分別為(0.545±0.051)mg·L-1、(0.587±0.030)mg·L-1、(0.66
5、7±0.017)mg·L-1、(0.733±0.0298)mg·L-1;AUC0~t 分別為(2.019±0.388)mg·L-1·h、(1.962±0.254)mg·L-1·h、(2.008±0.619)mg·L-1·h、(2.969±0.295)mg·L-1·h;CL 分別為(32.937±12.695)L·h-1·kg-1、(32.656±3.599) L·h-1·kg-1、(34.556±9.167)L·h-1·kg-1、(22
6、.748±4.654)L·h-1·kg-1。結(jié)果顯示葛根素與小檗堿合用后,葛根素和小檗堿混合用藥組(100 mg·kg-1+50 mg·kg-1)藥動學(xué)參數(shù)與葛根素組(100 mg·kg-1)無顯著性差異;葛根素和小檗堿混合用藥組(100 mg·kg-1+100 mg·kg-1、100 mg·kg-1+200 mg·kg-1) Cmax 增大,有顯著性差異(P<0.01);葛根素和小檗堿混合用藥組(100 mg·kg-1+200 mg·
7、kg-1) Cmax,AUC0~t 均增大,有顯著性差異(P<0.01)。
結(jié)論:
本實驗建立的大鼠血漿中葛根素HPLC測定法,操作簡單,費用低,方法可靠,靈敏度高,血漿中成分不干擾,能較好適應(yīng)目前大多數(shù)實驗室條件,適用于葛根素的血藥濃度檢測及藥動學(xué)研究。大鼠灌胃葛根素后的藥-時過程符合二室模型,與國內(nèi)外文獻相近,葛根素在動物體內(nèi)的藥動學(xué)過程的研究,有助開展中藥復(fù)方中主要有效成分間的配伍研究,探討中藥復(fù)方內(nèi)在
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