注射用載雌二醇m PEG-PLA緩釋微球的制備及體內(nèi)外釋放研究.pdf

1、本課題以聚乙二醇單甲醚-聚D,L-乳酸嵌段共聚物[mPEG-PLA]為載體材料,采用O/W乳化溶劑揮發(fā)法研究制備了注射用可生物降解載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球。用于肌肉或皮下注射給藥,在體內(nèi)隨著共聚物的水解作用,包埋于微球中的藥物經(jīng)擴(kuò)散作用釋放出來,達(dá)到緩釋長(zhǎng)效的目的。該制劑給藥方便,一次注射能夠維持一個(gè)月以上的藥效,可安全、有效地防治因雌激素匱乏導(dǎo)致的更年期綜合征。研究?jī)?nèi)容主要包括注射用載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的制備、微球

2、的體外釋藥機(jī)理研究以及體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究。
　　 1、注射用載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的制備研究
　　 本研究考察了乳化劑對(duì)O/W乳狀液的穩(wěn)定作用,發(fā)現(xiàn)了適合于mPEG-PLAO/W乳狀液的穩(wěn)定性較好的乳化劑。
　　 采用O/W乳化溶劑揮發(fā)法制備了雌二醇微球。選用中心組合設(shè)計(jì)及效應(yīng)曲面法對(duì)多因素多指標(biāo)制備工藝進(jìn)行綜合優(yōu)化篩選,得到較佳制備工藝。建立了對(duì)多因素多指標(biāo)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分析的綜合優(yōu)化篩選方法。結(jié)果表明所制得

3、的微球表面光滑圓整,粒徑分布均勻,平均粒徑為34.02±15.44μm。,跨距為1.02,包封率大于80％。
　　 建立了高效液相色譜法測(cè)定載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的含量,雌二醇在5～100μg·mL-1濃度范圍內(nèi),峰面積對(duì)濃度響應(yīng)值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。日內(nèi)精密度RSD≤0.49％,日間精密度RSD≤2.07％,回收率為98.85％。結(jié)果表明本方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,適用于mPEG-PLA嵌段共聚物微球中雌二醇的含量測(cè)

4、定。
　　 2、載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球體外釋放研究
　　 本研究模擬生理環(huán)境,分別采用兩種釋放介質(zhì),搖床法對(duì)優(yōu)化工藝制備的微球進(jìn)行體外釋放度評(píng)價(jià)測(cè)定。通過微球干燥失重實(shí)驗(yàn)、顯微鏡觀察微球的降解過程及對(duì)mPEG-PLAMw8982,Mw13602,Mw24766三種不同分子量制備的載雌二醇緩釋微球進(jìn)行體外釋放度測(cè)定,探索微球的降解過程與控制藥物釋放過程的關(guān)系,并進(jìn)行微球體外釋放動(dòng)力學(xué)研究。結(jié)果表明在pH7.4PB

5、S加入增溶劑的釋放介質(zhì)中微球表現(xiàn)出較好的釋藥行為,mPEG-PLA(Mw13602)載雌二醇緩釋微球第一天釋放量6.56％,30天累積釋放量85.81％,其釋藥行為符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程。
　　 同時(shí),對(duì)載雌二醇mPEG-PLA(Mw13602)緩釋微球建立了體外加速釋藥方法以縮短評(píng)價(jià)周期,對(duì)長(zhǎng)期試驗(yàn)和加速試驗(yàn)的釋放度數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性擬合。結(jié)果表明介質(zhì)的溫度越高釋放速率越快,釋放速率與溫度呈正相關(guān)性。對(duì)于mPEG-PLA(Mw1360

6、2)載雌二醇緩釋微球,介質(zhì)溫度在55℃時(shí),其加速釋放過程與長(zhǎng)期釋放過程具有良好的相關(guān)性(R2=0.9971).可通過加速實(shí)驗(yàn)的方法預(yù)測(cè)長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)的微球釋放度。
　　 3、載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球動(dòng)物體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究
　　 依據(jù)微球體外釋放度,選擇釋放特性符合設(shè)計(jì)要求的微球,以beagle犬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,對(duì)載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的體內(nèi)過程進(jìn)行了初步研究。beagle犬肌注微球給藥后,采用放射免疫法測(cè)定血藥濃度,

7、統(tǒng)計(jì)矩法計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù),結(jié)果表明該緩釋微球可有效控制藥物在體內(nèi)的釋放,能夠維持約2周較平穩(wěn)的血藥濃度,藥動(dòng)學(xué)參數(shù):AUC,AUMC,MRT分別為285.042(pg·d/mL);2197.96(pg·d2/mL);7.711(d)。體內(nèi)外釋放相關(guān)性分析結(jié)果為:對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的體外累積百分釋放量與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)AUC顯著相關(guān)(R2=0.9930)?？梢酝ㄟ^體外累積百分釋放量預(yù)測(cè)體內(nèi)對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的AUC值,推測(cè)體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程的相關(guān)情況。