稻瘟病菌一個(gè)假定的homeobox基因功能分析.pdf

1、在稻瘟病菌完成侵染致病循環(huán)的過程中，涉及稻瘟病菌的細(xì)胞分化，同源異型盒基因有可能參與這一過程的調(diào)控，在其中起著關(guān)鍵的作用。已克隆的同源異型盒基因所編碼的蛋白中具有保守結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，為我們提供了一條在稻瘟病菌基因組數(shù)據(jù)庫中分析尋找同源異型盒基因的途徑。因此，我們利用生物信息學(xué)在稻瘟病菌全基因組數(shù)據(jù)庫中分析得到7個(gè)假定的同源異型盒基因。通過構(gòu)建假定的同源異型盒基因MGG_00184.5基因缺失突變體△MG60184-1、△MG0184-10,

2、然后對(duì)基因缺失突變體進(jìn)行表型鑒定，分析其在菌絲生長(zhǎng)、交配、產(chǎn)孢及侵染性生長(zhǎng)等方面的表型變化。同時(shí)構(gòu)建基因功能互補(bǔ)載體，轉(zhuǎn)化突變體原生質(zhì)體，進(jìn)行MGG_00184.5基因缺失突變體表型恢復(fù)驗(yàn)證。 MGG 00184.5基因被敲除后，突變體△MGO18d-1、△MG0184-10表型分析結(jié)果顯示：(1)在CM固體培養(yǎng)基上突變體菌絲生長(zhǎng)速度比野生型菌株Guy11略快；突變體與野生型菌株Guy11的菌落顏色沒有差異，氣生菌絲的產(chǎn)生不存在

3、明顯差異。(2)突變體在米糠培養(yǎng)基上光照培養(yǎng)10d后，沒有產(chǎn)生孢子，而分生孢子梗的數(shù)量較野生型菌株Guy11有大量增加。(3)將野生型菌株Guy11和突變體菌絲塊接種在水稻和大麥的造傷葉片上，都可以觀察到菌絲侵入形成的病斑，而且野生型菌株Guy11和基因缺失突變體△MG0184-1、△MG0184-10之間的差異不明顯。(4)野生型菌株Guy11和突變體都能與不同交配型的菌株70-15正常交配，產(chǎn)生子囊孢子。 綜合以上的結(jié)果，我