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文檔簡(jiǎn)介
1、食管癌是最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一,我國(guó)食管癌患者的死亡率為15.15/10萬(wàn)人[1],5年生存率僅5%~10%,其中95%的臨床病理學(xué)特征為鱗癌。死亡的重要因素是早期即出現(xiàn)侵襲和轉(zhuǎn)移,其作用機(jī)制仍不明確,涉及到腫瘤細(xì)胞與宿主之間的相互作用,可能與多種基因及蛋白質(zhì)的表達(dá)相關(guān)。
熱休克蛋白是一類(lèi)高度進(jìn)化保守的應(yīng)激蛋白,可被多種刺激誘導(dǎo)合成產(chǎn)生,如腫瘤、缺氧和其他化學(xué)刺激。其參與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、免疫逃逸、治療及預(yù)后等過(guò)程。近年來(lái),
2、大量研究表明熱休克蛋白家族中的 HSP32、HSP27,可能參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程,然而關(guān)于 HSP32、HSP27在食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用并未見(jiàn)報(bào)道。
目的:
研究熱休克蛋白HSP32、HSP27在食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。
方法:
1.免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)食管鱗癌組織中HSP32、HSP27的表達(dá),并分析其與臨床病理資料的相關(guān)性;
2.利用體外細(xì)胞劃痕、Transwell實(shí)驗(yàn)
3、檢測(cè)食管鱗癌高低轉(zhuǎn)移細(xì)胞亞系轉(zhuǎn)移潛能的差異;
3. Western blot和qRT-PCR測(cè)定HSP32、HSP27在食管鱗癌不同轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞亞系中表達(dá)水平的變化,分析HSP32、HSP27在食管鱗癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用;
4.利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)上調(diào)HSP27在高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞亞系中的表達(dá)水平,通過(guò)體外Transwell、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及體內(nèi)裸鼠轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),觀察HSP27上調(diào)后食管鱗癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的變化;
結(jié)果
4、:
1. HSP32在食管鱗癌組織中呈高表達(dá),其陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤分化程度(P=0.039)、浸潤(rùn)程度T分期(P=0.020)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.017)、淋巴管浸潤(rùn)(P=0.037)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(P=0.038)有顯著相關(guān)性;HSP27在食管鱗癌組織中表達(dá)水平降低,其表達(dá)與腫瘤分化密切相關(guān)(P=0.023),與TNM分期(P=0.013),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.020)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(P=0.017)有關(guān),而與性別(P=0.752)
5、和患者的年齡(P=0.771)無(wú)顯著相關(guān)性;
2. EC9706-H、EC109-H細(xì)胞亞系侵襲轉(zhuǎn)移能力高;EC9706-L、EC109-L細(xì)胞亞系侵襲轉(zhuǎn)移能力低;
3. HSP32在兩對(duì)高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞亞系中表達(dá)水平較相應(yīng)的低轉(zhuǎn)移細(xì)胞亞系表達(dá)升高;HSP27在兩對(duì)高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞亞系中表達(dá)水平較相應(yīng)的低轉(zhuǎn)移細(xì)胞亞系表達(dá)降低;
4.利用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)特異性上調(diào)了高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞亞系中HSP27的表達(dá)水平,細(xì)胞劃痕
6、實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)證實(shí)其侵襲轉(zhuǎn)移能力下降;
5.體內(nèi)裸鼠轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)證實(shí),在高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞亞系中上調(diào)HSP27表達(dá)后,食管鱗癌細(xì)胞的體內(nèi)侵襲和轉(zhuǎn)移能力下降;
結(jié)論:
1. HSP32、HSP27與食管鱗癌的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān),但不同蛋白所起的作用并不相同。HSP32的表達(dá)水平與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),HSP27的表達(dá)水平與食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān);
2.上調(diào) HSP27表達(dá)水平后,能在體內(nèi)
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