殼聚糖及其衍生物接枝多肽的制備及其性能研究.pdf

1、殼聚糖及羧甲基殼聚糖作為一種性能優(yōu)異的生物醫(yī)用材料，因其良好的生物活性已備受關(guān)注，而膠原蛋白肽因具有良好的生物相容性、生物可降解性、抗氧化性、吸濕保濕性等在日化、醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域的研究掀起熱潮。在食品行業(yè)中，乳酸鏈球菌肽（nisin）作為國(guó)際上許可使用的生物防腐劑，具有安全無(wú)毒無(wú)害的特點(diǎn)，近年來(lái)，乳酸鏈球菌肽作為一種天然抗菌劑在醫(yī)藥領(lǐng)域也逐漸得到研究。本論文以微生物轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶（MTGase）為催化劑，避免了因交聯(lián)劑的引入帶來(lái)的副反應(yīng)和

2、毒性作用，將膠原蛋白肽、乳酸鏈球菌肽接枝到殼聚糖、羧甲基殼聚糖上，制備的材料具有較好的水溶性、吸濕保濕性、抗氧化性、促進(jìn)細(xì)胞增殖等優(yōu)良性能，這為研究開發(fā)新型的生物材料奠定了良好的研究基礎(chǔ)。本論文的研究?jī)?nèi)容如下：
　?。?）以轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶為催化劑，催化膠原蛋白肽分子鏈以酰胺鍵接枝到殼聚糖骨架上，在水相中制備殼聚糖-膠原蛋白肽。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化結(jié)果表明，制備殼聚糖-膠原蛋白肽的最佳反應(yīng)條件為：反應(yīng)時(shí)間為1h，反應(yīng)溫度為40℃，膠原蛋

3、白肽與殼聚糖質(zhì)量比為1.0，轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶與殼聚糖質(zhì)量比為1.0；吸濕保濕性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：隨著取代度的增加，殼聚糖-膠原蛋白肽的吸濕率和保濕率也隨之增大；體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：取代度的增加對(duì)殼聚糖-膠原蛋白肽的過(guò)氧化氫清除率初始階段并無(wú)明顯的變化，隨著樣品濃度的增大，殼聚糖-膠原蛋白肽清除過(guò)氧化氫的能力有一定的增加，尤其是在高取代度下，殼聚糖-膠原蛋白肽濃度對(duì)過(guò)氧化氫清除率影響明顯。隨著濃度增加，殼聚糖-膠原蛋白肽的1,1-二苯基-2-

4、三硝基苯肼（DPPH）清除能力在初始增加緩慢，隨后DPPH清除能力明顯增強(qiáng)。在高濃度時(shí)，隨著殼聚糖-膠原蛋白肽的取代度增加，其DPPH清除率也隨之增大；對(duì)L929成纖維細(xì)胞存活率實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：隨著殼聚糖-膠原蛋白肽濃度的增大，成纖維細(xì)胞存活率也隨之增加，但其取代度與成纖維細(xì)胞存活率無(wú)正相關(guān)關(guān)系。
　?。?）以轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶為催化劑，催化膠原蛋白肽分子鏈以酰胺鍵接枝到羧甲基殼聚糖骨架上，在水相中制備羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽。通過(guò)單因素

5、實(shí)驗(yàn)優(yōu)化結(jié)果表明，制備羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽的最佳反應(yīng)條件為：反應(yīng)時(shí)間為6h，反應(yīng)溫度為40℃，膠原蛋白肽與羧甲基殼聚糖質(zhì)量比為1.0，反應(yīng)溶液pH為6.0；吸濕保濕性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：隨著取代度的增加，羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽的吸濕率和保濕率也隨之增大；體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：取代度的增加對(duì)羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽的過(guò)氧化氫清除率并無(wú)明顯的影響，但隨著樣品濃度的增大，羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽清除過(guò)氧化氫的能力有一定的增加，尤其是在高取代

6、度下，羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽濃度對(duì)過(guò)氧化氫清除率影響明顯。隨著濃度增加，羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽的DPPH清除能力在初始明顯增強(qiáng)，隨后DPPH清除能力增加緩慢。在高濃度時(shí)，隨著羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽的取代度增加，其DPPH清除率也隨之增大；對(duì)L929成纖維細(xì)胞存活率實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：隨著羧甲基殼聚糖-膠原蛋白肽濃度的增大，成纖維細(xì)胞存活率呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì)，在相同濃度下，隨著其取代度的增加，成纖維細(xì)胞成活率也隨之增加。
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7、3）以轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶為催化劑，催化乳酸鏈球菌肽分子鏈以酰胺鍵接枝到殼聚糖骨架上，在水相中制備殼聚糖-乳酸鏈球菌肽。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化結(jié)果表明，制備殼聚糖-乳酸鏈球菌肽的最佳反應(yīng)條件為：反應(yīng)時(shí)間為1.5 h，反應(yīng)溫度為30℃，乳酸鏈球菌肽與殼聚糖質(zhì)量比為1.2；水溶性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：取代度為0.098、0.473的殼聚糖-乳酸鏈球菌肽的透過(guò)率均在90％以上，濃度達(dá)到20 mg/ml時(shí)其透過(guò)率也在90%以上，證實(shí)殼聚糖接枝乳酸鏈球菌肽后改善了殼