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1、目的:血小板衍生生長因子(PDGF)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)在嬰兒膽道梗阻肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的表達(dá)。探討嬰兒膽道梗阻時(shí),PDGF細(xì)胞因子及α-SMA蛋白與肝內(nèi)膽小管增生的關(guān)系,進(jìn)而說明PDGF細(xì)胞因子及α-SMA蛋白在嬰兒膽道梗阻肝纖維化過程中的作用,同時(shí)探討PDGF及α-SMA在肝纖維化中的相互作用,闡明膽道梗阻患兒肝纖維化進(jìn)展迅速的部分機(jī)制。
方法:標(biāo)本選自河北醫(yī)科大學(xué)二院住院的膽道梗阻患兒手術(shù)活檢肝組織30例
2、(觀察組),均以行99mTC-EHIDA(美國產(chǎn)INFINIA-Ⅱ-hawkeye檢查設(shè)備)肝膽顯像追蹤至24 h內(nèi)膽囊和腸道未出現(xiàn)放射性標(biāo)本顯影為標(biāo)準(zhǔn),并選取晚期胎兒肝組織蠟塊5例做為對照組。采用masson三色染色,光鏡觀察肝小葉匯管區(qū)肝纖維化情況。采用兔抗人血小板衍生生長因子(PDGF)單克隆抗體(編號ZA-0505,武漢博士德生物工程有限公司)及兔抗人平滑肌肌動蛋白-a單克隆抗體(編號BA0752,武漢博士德生物工程有限公司),
3、應(yīng)用免疫組化方法染色觀察PDGF及α-SMA在肝組織中的表達(dá)部位及水平。根據(jù)Masson三色染色觀察膽小管增生的程度及肝纖維化的程度并結(jié)合PDGF及α-SMA免疫組化染色檢測結(jié)果進(jìn)行綜合分析。
結(jié)果:膽道梗阻各組PDGF及α-SMA免疫組化染色陽性分布程度均明顯高于對照組,膽道閉鎖組和濃縮膽栓綜合征組間PDGF及α-SMA的表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)明顯差異。膽道梗阻組肝組織門管區(qū)膽小管增生及纖維化明顯,對照組肝組織無明顯膽小管增生及
4、纖維化。膽道梗阻組內(nèi)膽道閉鎖組和濃縮膽栓綜合征組間膽小管增生及肝纖維化的程度不同。在膽道梗阻組內(nèi),PDGF及α-SMA與膽小管增生的程度具有相關(guān)關(guān)系且呈正相關(guān);膽小管增生的程度與肝纖維化的程度具有相關(guān)關(guān)系且呈正相關(guān);PDGF與α-SMA的表達(dá)具有相關(guān)關(guān)系且呈正相關(guān)。
結(jié)論:PDGF及α-SMA是嬰兒膽道梗阻肝纖維化發(fā)生發(fā)展過程中重要的細(xì)胞因子及蛋白。PDGF及α-SMA在嬰兒膽道梗阻時(shí)膽管上皮細(xì)胞顯著表達(dá),兩者均與膽小管增
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