腦出血血腫周圍區(qū)PI3K-AKT信號通路的激活及干預(yù)的實驗研究.pdf

1、目的：通過觀察P13K／Akt信號通路在大鼠腦出血血腫周圍區(qū)的活性變化規(guī)律，研究其內(nèi)源性神經(jīng)保護作用；經(jīng)外源性激活該信號通路，觀察其神經(jīng)保護效應(yīng)，并初步探討其神經(jīng)保護作用的機理。 方法：健康大鼠隨機分成3組：假手術(shù)組、腦出血對照組、NGF干預(yù)組，后兩組再隨機分成6h、12h、1d、2d、4d、7d組。采用Ⅶ膠原酶立體定位法制備大鼠急性腦出血模型。各組在規(guī)定時間點取材，用HE染色光鏡觀察血腫周圍區(qū)組織學(xué)改變；免疫組化方法觀察p-A

2、kt、Bax、Bcl-2的表達；TdT介導(dǎo)dUT缺口末端標(biāo)記法觀察TUNEL陽性細胞的表達。參照Berderson's法對神經(jīng)功能缺損體征評分。 結(jié)果： 1．大鼠腦出血后6h血腫周圍區(qū)即有p-Akt表達，12h表達增多，ld達高峰，7d仍有表達，各時間點免疫標(biāo)記神經(jīng)元均比假手術(shù)組增高(p

3、增高(P<0．01)。 2．Bcl-2、Bax、TUNEL陽性細胞在腦出血6h即有表達。Bcl-2表達1d達高峰后迅速減少，至7d仍有少量表達；Bax、TUNEL的陽性表達在2d達高峰，4d有所下降，7天仍有表達。各時間點均比假手術(shù)組增高(p<0．01)。干預(yù)組Bcl-2的表達除6h外，其余各時間點均比對照組增高(p

4、功能缺損評分最高，隨后降低。NGF干預(yù)組在1d時評分最高，1-4d與對照組相比無明顯改善，7d時神經(jīng)功能缺損體征好轉(zhuǎn)(p<0．05)。 結(jié)論：P13K／Akt信號通路在腦出血早期即被激活，參與了腦出血的病理過程。凋亡是腦出血血腫周圍區(qū)重要的細胞死亡形式，凋亡基因Bax、Bcl-2對其有調(diào)節(jié)作用。NGF能通過增加Bcl-2的表達和抑制Bax表達保護腦組織，減少腦出血后神經(jīng)細胞凋亡，此作用可能與Akt的激活有關(guān)。NGF對神經(jīng)功能缺損