運(yùn)用SELDI-TOF MS篩選腎移植急性排斥反應(yīng)特異性標(biāo)志物的初步研究.pdf

1、目的：尋找腎移植急性排斥反應(yīng)患者血清中所特有的蛋白質(zhì)標(biāo)志物，為臨床腎移植急性排斥反應(yīng)非侵入性的早期診斷、預(yù)警和特異性標(biāo)志物的篩選提供靈敏的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。 方法：應(yīng)用美國(guó)Ciphergen PBSⅡ表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(surface-enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS)蛋白組學(xué)研究平臺(tái)，對(duì)腎

2、移植患者術(shù)前、術(shù)后的血清進(jìn)行檢測(cè)，其中5例病理診斷為急性排斥組(血清標(biāo)本共30份)，25例為術(shù)后穩(wěn)定組(血清標(biāo)本共50份)，15例尿毒癥疾病對(duì)照組(血清標(biāo)本共30份)。采用BMW(Biomarker Wizard)軟件和BPSS5.0(Biomarker patterns systems)軟件分析差異蛋白峰，建立診斷模型，以此模型進(jìn)行雙盲驗(yàn)證，并對(duì)急性排斥組進(jìn)行單個(gè)患者的縱向分析。 結(jié)果：M/Z位于1000-100000范圍內(nèi)，

3、腎移植急性排斥反應(yīng)組和術(shù)后穩(wěn)定組血清中共檢測(cè)到188個(gè)差異蛋白質(zhì)峰(p<0.05)，其中有51個(gè)顯著差異蛋白P<0.001，這些差異顯著的蛋白峰聚集在3888～5905、7344～9501以及11342～11940、12149～14687范圍內(nèi)。經(jīng)BMW軟件分析發(fā)現(xiàn)，在這些蛋白質(zhì)峰中有24個(gè)蛋白峰出現(xiàn)從疾病對(duì)照組到急性排斥組、穩(wěn)定存活組依次遞增或遞減的趨勢(shì)，其中有14個(gè)蛋白峰依次遞增，10個(gè)依次遞減。由BPS軟件分析篩選出的M_8136

4、和M_5872這2個(gè)蛋白峰組成的蛋白質(zhì)質(zhì)譜分類(lèi)決策樹(shù)，能判別腎移植急性排斥組、穩(wěn)定存活組以及疾病對(duì)照組，敏感度、特異度高，并能用于判斷腎移植急性排斥組的排斥期和緩解期。 結(jié)論：SELDI-TOF MS技術(shù)平臺(tái)可用于篩選腎移植患者血清中的特異性標(biāo)志物。所得到的差異性蛋白峰M_8136和M_5872的診斷模型敏感度和特異度高，可用于診斷腎移植急性排斥反應(yīng)，并且對(duì)其早期預(yù)警以及治療有一定臨床意義。所獲得的差異性蛋白峰有利于腎移植急性排