肺鱗癌血清特異性標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的：應(yīng)用雙向凝膠電泳-質(zhì)譜技術(shù)，研究原發(fā)性肺鱗狀細(xì)胞癌患者與健康人血清蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜的差異，尋找和確定原發(fā)性肺鱗狀細(xì)胞癌特征性血清標(biāo)志物。為肺鱗癌的臨床早期診斷、治療以及預(yù)后評價(jià)提供可靠的、準(zhǔn)確靈敏的實(shí)驗(yàn)室參考指標(biāo)。 方法：肺鱗狀細(xì)胞癌患者與正常人血清標(biāo)本獲得后，雙向凝膠電泳的第一向采用固相pH梯度電泳，第二向采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質(zhì)組成分。電泳后經(jīng)銀染或考馬斯亮藍(lán)染色，PDQuest雙向凝膠電泳軟件分析

2、，將有意義的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)取出，經(jīng)過基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF)鑒定。 結(jié)果：1.通過實(shí)驗(yàn)獲得了較好的肺鱗狀細(xì)胞癌患者及正常人血清蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜。 2.肺鱗狀細(xì)胞癌患者血清與正常健康個(gè)體血清相比較，經(jīng)雙向凝膠電泳軟件分析，共找到12個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其中4個(gè)蛋白質(zhì)在肺鱗狀細(xì)胞癌患者血清中含量降低，6個(gè)蛋白質(zhì)含量增加，2個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)為肺鱗狀細(xì)胞癌患者血清所特有。 3.在肺鱗狀細(xì)胞癌中含

3、量減低的1個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)(Spot1)和在肺鱗狀細(xì)胞癌中含量增加的3個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)(Spot5、6、7)以及在肺鱗狀細(xì)胞癌中所特有的1個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)(Spot11)共5個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)MALDI-TOF質(zhì)譜鑒定，成功得到了5張肽質(zhì)量指紋圖譜，經(jīng)數(shù)據(jù)庫檢索鑒定分析，確定在肺鱗狀細(xì)胞癌患者血清中含量減低的蛋白質(zhì)點(diǎn)Spot1是免疫球蛋白輕鏈V區(qū)；在肺鱗狀細(xì)胞癌患者血清中含量增加的蛋白質(zhì)點(diǎn)Spot5，Spot6，Spot7分別是組織多肽抗原、胎盤生長因子、生長因