妊娠期高血壓疾病血清特異性標志物篩選的初步研究.pdf

1、目的：妊娠期高血壓疾病(hypertensivedisordercomplicatingpregnancy)是嚴重危害母嬰健康的產科疾病，是導致產婦及新生兒死亡的主要原因之一。雖經過多年的研究，該病的發(fā)病機制至今仍未完全闡明。由于妊娠期高血壓疾病病因不明，且無有效的治療方法，所以早期篩查高危孕婦，適時監(jiān)控高危人群，對減少該病的發(fā)生、降低孕產婦及圍產兒死亡率顯得尤為重要。但至今為止尚無特異性的血清標志物可作為早期篩查的指標。隨著蛋白質組學

2、的出現為我們研究妊娠期高血壓疾病的發(fā)病機制和早期篩查提供了一個全新的方法和思路。 蛋白質組學是研究細胞或機體全部蛋白質的表達及其活動方式。蛋白質組學研究技術主要由雙向凝膠電泳和生物質譜技術為支撐平臺，生物信息學為橋梁，對蛋白質表達模式和蛋白組功能模式進行研究。蛋白質組學研究技術不僅可以發(fā)現特異性標志物，而且可以發(fā)現與疾病相關的多種方式組合的蛋白質譜。目前利用蛋白質組學研究技術已成功地發(fā)現了肝癌、淋巴母細胞瘤、食管癌、卵巢癌等腫瘤

3、以及阿耳茨海默病疾病的特異性標志物，而且在研究疾病的發(fā)病機制方面取得了可喜的突破。 本實驗采用表面加強激光解析電離飛行時間質譜(Surface-EnhancedLaserDesorption/IonizationTimeofFlight-MassSpectrometry，SELDI-TOF-MS)技術繪制妊娠期高血壓疾病患者和正常孕婦血清蛋白質譜圖，通過比較分析，篩選妊娠期高血壓疾病的血清蛋白質特異性標志物，以期獲得妊娠期高血壓

4、疾病早期篩查的血清學指標，同時期望獲得疾病特異性相關蛋白，為我們深入研究該病的發(fā)病機制提供了新的方向。 方法：1.收集孕34+1～40+2周妊娠期高血壓疾病患者及正常孕婦血清各21例，用SELDI-TOF-MS技術繪制血清蛋白質譜圖，篩選妊娠期高血壓疾病的血清特異性標志物。 2.收取孕13～16周健康孕婦血清，持續(xù)隨訪，根據妊娠結果，將其分成妊娠期高血壓疾病組和正常孕婦對照組。用SELDI-TOF-MS技術比較上述兩組在

5、妊娠13～16周的血清蛋白質組差異，同時比較正常孕婦組在孕13～16周與孕38～40周血清蛋白質組差異，進行早期血清特異性標志物的篩選以及發(fā)病機制的探討。 結果：1.妊娠期高血壓疾病患者與正常晚期妊娠孕婦的血清蛋白質譜圖在質荷比(mass/charge，M/Z)為1000～20000的范圍內有明顯差異。妊娠期高血壓疾病患者血清中，M/Z為3245的蛋白質相對含量(0.46±0.41)明顯低于正常孕婦(1.28±0.44)(P＜0

6、.05)，而M/Z為1324、13749的蛋白質相對含量(1.59±0.08、0.87±0.03)均高于正常孕婦(1.23±0.03、0.55±0.07)(P＜0.05)。 2.在質荷比為1000～20000的范圍內，妊娠期高血壓疾病患者與正常孕婦的血清蛋白質組譜圖在孕13～16周時存在差異。妊娠期高血壓疾病組的血清蛋白質譜圖中M/Z為1324、3942、8895、13749的蛋白質的相對含量(1.61±0.10；14.89±3

7、.24；9.80±2.38；1.08±0.18)明顯高于正常對照組(1.31±0.2232.63±6.64；13.20±1.92；0.56±0.12)(P＜0.05)；而質荷比為2824、3245的蛋白質的相對含量明顯低于(9.70±2.40；0.52±0.35)正常對照組(13.40±2.75；1.36±0.42)(P＜0.05)。3.在M/Z為1000～20000的范圍內，正常孕婦中期妊娠血清中有多個蛋白質相對含量與晚期妊娠不同。中

8、期妊娠血清中M/Z為2824、4652、6117、2959、6203、5072、2732、9720、4161、4182、8942、9415、3821、4495的蛋白質的相對含量與晚期妊娠有差異(P＜0.05)。 結論：1.在M/Z為1000～20000的范圍內，妊娠期高血壓疾病患者與正常孕婦在妊娠晚期的血清蛋白質組譜圖有明顯差異。根據實驗結果，M/Z為1324、3245、13749的蛋白質組有望作為妊娠期高血壓疾病的血清特異性標

9、志物。 2.在M/Z為1000～20000的范圍內，妊娠期高血壓疾病患者與正常孕婦的血清蛋白質譜圖在妊娠13～16周存在差異。實驗結果提示，若正常孕婦在妊娠13～16周時血清蛋白質譜圖中出現了由M/Z為1324、3245、13749的蛋白質組成的蛋白質組，可能會發(fā)展成為妊娠期高血壓疾病患者。該蛋白質組可望作為臨床早期篩查妊娠期高血壓疾病的預警指標，為質譜技術應用于妊娠期高血壓疾病早期篩查提供實驗依據。 3.血清中M/Z為