膿毒癥大鼠肺組織中糖皮質(zhì)激素受體的變化及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、研究背景：膿毒癥已成為嚴(yán)重危害人類健康的危重病之一，目前其發(fā)病機(jī)制仍未完全闡明，其治療依然是臨床中的一大棘手問(wèn)題。糖皮質(zhì)激素受體(GR)是一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，參與調(diào)控多種基因的表達(dá)。烏司他丁(UTI)可以通過(guò)抑制蛋白酶的活性，清除氧自由基，抑制炎癥介質(zhì)的過(guò)度產(chǎn)生，減輕多種臟器的損害，臨床應(yīng)用于多種炎性疾病的治療。但目前尚不清楚烏司他丁是否可影響GR的表達(dá)和活性，從而進(jìn)一步干預(yù)膿毒癥的炎癥反應(yīng)過(guò)程。
　　 研究目的：觀察膿毒癥

2、發(fā)生時(shí)肺組織GR表達(dá)，以及給予烏司他丁干預(yù)對(duì)膿毒癥中GR表達(dá)的影響。
　　 研究方法：將Wistar大鼠隨機(jī)分為三組，假手術(shù)對(duì)照組(假手術(shù)組)、膿毒癥模型組(模型組)、UTI治療組(UTI組)，利用盲腸結(jié)扎穿刺(CLP)法制造膿毒癥模型，術(shù)后0h、12h給予靜脈注射UTI5萬(wàn)u/kg(UTI組)或等量生理鹽水(模型組)。分別于6h、12h和24h處死大鼠，留取血漿和肺組織，利用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血漿細(xì)胞因子TNF-

3、α、IL-1β、IL-6、IL-10水平，蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肺組織病理改變，化學(xué)比色法測(cè)定肺組織MDA、SOD的含量，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肺組織中GR-α蛋白的表達(dá)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)肺組織GRmRNA、NF-κBmRNA的含量。
　　 結(jié)果：①HE染色顯示各個(gè)時(shí)間點(diǎn)UTI組肺組織病理改變均較模型組減輕，24h時(shí)肺損傷評(píng)分顯著降低(P＜0.05)。②ELISA結(jié)果示模型組和UTI組血漿TNF-α、lL-iβ、IL-6

4、、IL-10含量均較假手術(shù)組呈不同程度升高(P＜0.05或P＜0.01)；UTI能夠降低膿毒癥發(fā)生時(shí)各細(xì)胞因子的表達(dá)，24h時(shí)UTI組較模型組各細(xì)胞因子水平均顯著降低(P＜0.01)。③模型組和UTI組MDA含量高于假手術(shù)組(P＜0.01)，SOD活性較假手術(shù)組降低(P＜0.01)；12h、24h時(shí)，UTI組較模型模型組MDA含量明顯降低(P＜0.01)，SOD活性顯著升高(P＜o(jì).01)。④GR-α在假手術(shù)組肺組織中表達(dá)最多(P＜0.

5、01)；模型組GR-α的表達(dá)在術(shù)后6h、12h、24h呈現(xiàn)下降趨勢(shì)；UTI能夠上調(diào)膿毒癥肺組織中GR-α的表達(dá)，UTI24h組GR-α的表達(dá)顯著高于模型組(P＜0.01)。⑤膿毒癥導(dǎo)致肺組織中GR mRNA的表達(dá)均較假手術(shù)組顯著降低(P＜0.01)；UTI治療24h后GR mRNA的含量高于模型組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。⑥膿毒癥24h組大鼠肺組織中NF-κB mRNA的表達(dá)較假手術(shù)組升高(P＜0.05)，UTI組24hNF-k

6、B mRNA的表達(dá)比模型組明顯降低(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：膿毒癥大鼠肺組織中GR的表達(dá)顯著減少；烏司他丁能夠抑制膿毒癥中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的過(guò)度釋放，增強(qiáng)肺組織中SOD的活性，降低MDA的水平，上調(diào)肺組織GR的表達(dá)。因此，我們推測(cè)GR在膿毒癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮了重要作用，烏司他丁可能可以通過(guò)調(diào)控NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活性，減輕炎癥級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)，改善氧化應(yīng)激水平，從而調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)，減