高水溶性蛇葡萄素鈉鹽的制備及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的：研究高水溶性Amp鈉鹽的制備方法并比較Amp-Na和Amp-DMSO對(duì)人白血病K562細(xì)胞的增殖抑制作用；考察Amp-Na單用及與卡鉑合用對(duì)人肺癌SPC-A-1細(xì)胞的增殖抑制作用及其對(duì)人SPC-A-1肺癌、小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22皮下移植瘤的抑制作用；初步確定Amp-Na的作用機(jī)制、急性毒性及其急性毒性作用的靶器官。 方法：1.Amp分別與NaHCO3和Na2CO3按一定比例制備成Amp-Na溶液，比較二者的溶解性

2、、溶解穩(wěn)定性及pH值。 2.用MTT法考察同濃度Amp-Na與Amp-DMSO對(duì)人白血病K562細(xì)胞增殖的抑制作用，比較二者的IR和IC50；考察Amp-Na單用及與卡鉑合用對(duì)人肺癌SPC-A-1細(xì)胞的增殖抑制作用；使用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期和凋亡率。 3.用荷肉瘤S180和肝癌H22的昆明種小鼠及荷人SPC-A-1肺腺癌的裸鼠，觀察Amp-Na單用及與多種化療藥合用對(duì)小鼠肉瘤S180、小鼠肝癌H22和人SPC-A-1肺

3、腺癌的抑制作用。 4.初步評(píng)價(jià)Amp-Na對(duì)昆明種小鼠腹腔注射和靜脈注射的急性毒性，計(jì)算LD50或最大耐受量。以溶媒組為對(duì)照，觀察Amp-Na1000mg/kg靜脈注射后小鼠血清ALT濃度和肝臟指數(shù)變化，用病理組織學(xué)分級(jí)法，評(píng)價(jià)肝損傷程度。 結(jié)果：1.Amp與Na2CO3按摩爾比1∶4比例制備的Amp-Na，水溶性增強(qiáng)且溶解性穩(wěn)定。Amp-Na在pH=5.0磷酸鹽緩沖液中的穩(wěn)定性優(yōu)于pH=6.8的磷酸鹽緩沖液。2.相同濃

4、度的Amp-DMSO和Amp-Na對(duì)K562細(xì)胞的IR和IC50值相似，說明Amp在制備成鈉鹽后其抗腫瘤的藥理活性無(wú)明顯變化；Amp-Na單用對(duì)SPC-A-1細(xì)胞的IC50為70.7μg/ml，其作用機(jī)制是誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和形成細(xì)胞S期阻滯；Amp-Na(50-100μg/ml)與卡鉑合用對(duì)人肺癌SPC-A-1細(xì)胞的增殖具有協(xié)同抑制作用。 3.Amp-Na單獨(dú)用藥無(wú)或僅有較弱的抗腫瘤作用；Amp-Na與化療藥聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同抗人肺癌

5、SPC-A-1細(xì)胞和小鼠肉瘤S180皮下移植瘤的作用；但無(wú)明顯協(xié)同抗小鼠肝癌H22作用。 4.Amp-Na腹腔注射，對(duì)雄性小鼠的LD50值為688.537mg/kg，對(duì)雌性小鼠的LD50值為317mg/kg左右；Amp-Na靜脈注射，對(duì)雄性和雌性小鼠的最大耐受量均為2000mg/kg以上，肝臟為Amp-Na急性毒性作用的靶器官之一。 結(jié)論：Amp與Na2CO3按摩爾比1∶4比例制備的Amp-Na，具有水溶性強(qiáng)、溶解性穩(wěn)定