中國生殖器疣和子宮頸癌HPV感染型別流行病學研究.pdf

1、研究背景HPV（HumanPapillomavirus人乳頭狀瘤病毒）病毒是危害人類健康的重要感染因素之一，它是引發(fā)生殖器疣和子宮頸癌的主要病因。2003年中國疾病預防控制中心發(fā)表數(shù)據(jù)顯示，生殖器疣新發(fā)病例數(shù)為154,922，發(fā)病率為12.02/10萬。世界衛(wèi)生組織IARC2004年發(fā)表的數(shù)據(jù)顯示中國每年有45689例新發(fā)子宮頸浸潤癌，占全世界子宮頸新發(fā)病例的十分之一。隨著醫(yī)學科技進展，已經(jīng)研發(fā)出有效的針對HPV感染的基因重組疫苗(re

2、combinantvaccine)，目前疫苗主要針對的HPV型別包括HPV16、18、6和11型。由于還沒有采用標準化的、高靈敏度檢測方法獲得全國HPV型別分布的流行病學數(shù)據(jù)，尚不能對該疫苗推廣后可能產(chǎn)生的預防效果做出準確的評價。
　　 研究目的：在中國不同地區(qū)開展以醫(yī)院為基礎的現(xiàn)況研究，調查具有生殖器疣、浸潤性子宮頸癌(ICC)和CIN2以上的病例中HPV感染的流行情況和HPV的型別分布。
　　 材料與方法：采用分層抽

3、樣方法選擇研究對象，按照地理分布將全國分為東北、華北、西北、華中、西南、華南和華東7個大區(qū)，在每個大區(qū)遴選合作醫(yī)院，共選擇18家醫(yī)院提供確診生殖器疣病人及其標本和19家醫(yī)院提供確診子宮頸病變病人及其組織蠟塊。
　　 疣體組織標本的HPV型別判定：采用酚，氯仿方法抽提DNA，使用通用引物MY09/11，MY09/GP5+和GP5+/GP6+以及巢式PCR擴增140-bp目標DNA。電泳分離后直接測序，如果是單一感染，直接用BLAS

4、T2.0判定HPV型別；如果是多重感染，使用T-vector轉化E.coli.，隨機挑選五個克隆后測序，判定HPV型別。宮頸病變組織蠟塊標本的HPV型別判定：用三明治切片法，第一張和最后一張蠟卷用于HE染色，中間蠟卷用于DNA提取。HE切片由病理專家組完成診斷。將經(jīng)過病理確認合格的蠟卷與蛋白酶k溶液混合，70度過夜消化，以SPF10為引物擴增，用DNA酶免疫分析(DEIA)判定是否存在HPV感染，用SPF10LiPA25(version

5、l)試劑盒對擴增產(chǎn)物進行型別判斷。
　　 結果：本研究獲得1295例確診的生殖器疣病人及其福爾馬林固定的標本。因PCR擴增抑制或沒有提取出足夠量DNA，排除290例病人的標本，余下1005例病人標本符合本次實驗的要求，用于本次的生殖器疣HPV感染的分析研究。生殖器疣患者的平均年齡為32歲，女性占55.3％(556/1005)多于男性的44.7%(449/1005)。1005例生殖器疣病人中HPV陽性者為891例，感染率為88.7

6、%。在HPV陽性病例中，HPV6和HPV11分別占46.6%和42.4%，是最常見的HPV型別，其次是HPV16占11.8%;其它型別在HPV陽性病例中的比例均小于1%。891例病人中，單一型別HPV陽性率為97.2%，而多重感染比例僅為2.8%。多重感染的型別包括HPV6、11和16。HPV6、11和16型感染占全部生殖器疣HPV陽性病例的97.9%。未發(fā)現(xiàn)不同大區(qū)、城市和農村、不同性別和年齡組間HPV6和11型別分布存在統(tǒng)計學意義的

7、差別。
　　 本次研究共獲得664例ICC病人，其中鱗癌(SCC)630例、腺癌(ADC)34例，并獲得CIN2/3病人569例。SCC病人HPV感染率為97.6%，ADC為85.3%，CIN2/3為98.9%。HPV16(76.7%)和HPV18(7.8%)是SCC病人中最常見的感染型別，兩者合計占SCC病人的84．0%；其次是HPV31占3.2%，HPV52占2.2%，HPV58占2.2%。在不同地區(qū)間SCC病人HPV感染率

8、差別沒有統(tǒng)計學顯著意義。但是，SCC病人中，≤49歲年齡組的HPV16感染率大于50歲年齡組(P=0.003)，而HPV52,58和39在高年齡組有更高的感染率；相反在CIN2和CIN3病人中，≤34歲和35-49歲年齡組HPV16感染率小于50歲年齡組(P=0.01)，而HPV52、58和39在低年齡組感染率更高。與SCC病人相比，CIN2/3病人有更高的HPV31、52和58感染率，而HPV16和18的感染率則低SCC病人。