芍藥苷誘導子宮頸癌HeLa細胞凋亡的相關研究.pdf

1、目的:宮頸癌是全球婦女中最常見的惡性腫瘤之一，僅次于乳腺癌。據(jù)國際癌癥研究中心估計，2002年全世界有493000例新發(fā)病例，274000例死亡病例，其中83％的宮頸癌發(fā)生在發(fā)展中國家。近年來宮頸癌發(fā)病逐漸出現(xiàn)年輕化趨勢，腺癌比例也有所上升。隨著富頸癌發(fā)病年輕化及患者對治療后生活質量要求的提高，化療已由晚期姑息治療轉為有效的綜合治療。因此尋找高效低毒藥物是提高化療成功率和患者生存率、改善患者生活質量的關鍵。
　　 天然中草藥因其

2、低毒高效特點已經(jīng)成為國內(nèi)外抗癌藥物研發(fā)的熱點，芍藥苷是一種天然單萜類糖苷化合物，是傳統(tǒng)中藥赤芍的主要有效成分，具有抗炎、神經(jīng)保護、鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)免疫等多種生物學效應，新近藥理研究表明芍藥苷具有潛在的抗腫瘤作用。然而其有無抗宮頸腫瘤效應及其作用機制尚不清楚。本研究通過體外培養(yǎng)人宮頸癌HeLa細胞，觀察芍藥苷對HeLa細胞增殖和凋亡作用的影響，為臨床應用芍藥苷治療宮頸癌提供實驗依據(jù)。
　　 實驗材料及方法:不同濃度芍藥苷作用于人宮頸癌H

3、eLa細胞后，采用MTT法檢測不同時間HeLa細胞的生長抑制效應，計算出藥物的半量抑制濃度(IC50)，據(jù)此確定芍藥苷適當濃度用于細胞凋亡及凋亡相關調(diào)控基因實驗。膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素(FITC)／碘化丙啶(PI)雙染色流式細胞術檢測HeLa細胞凋亡率及細胞周期變化，透射電鏡觀察HeLa細胞形態(tài)變化，免疫細胞化學法檢測芍藥苷作用后HeLa細胞Bc1-2、Bax及Caspase-3表達的變化。
　　 結果:不同濃度的芍藥苷作用

4、不同時間后，對子宮頸癌HeLa細胞的生長抑制率呈明顯的濃度-時間依賴關系，在24、48、72h的IC50值分別為5054、2965、2459μg/ml;應用不同濃度芍藥苷后HeLa細胞凋亡率逐漸增高，對照組及1000、2000μg/ml組凋亡率分別為0.94％、10.94％、13.95％，細胞周期S期比例呈增多趨勢；芍藥苷作用48h后透射電鏡下可見HeLa細胞出現(xiàn)典型凋亡改變；芍藥苷作用于HeLa細胞48h后，與對照組相比Bcl-2表達