單壁碳納米管誘導的大鼠主動脈內(nèi)皮細胞凋亡機制的研究.pdf

1、單壁碳納米管(SWCNTs)的應用日益廣泛,前景非常可觀,在現(xiàn)代工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)以及科研應用中都起著非常重要的作用,所以,其安全性是一個必須要注意的問題。目前,有關單壁碳納米管的生物毒性效應的研究較多,但是,有關單壁碳納米管與心血管疾病之間的聯(lián)系的相關研究卻很少,于是,選取內(nèi)皮細胞作為靶細胞來進行研究,首先對單壁碳納米管所致的內(nèi)皮細胞氧化損傷的進行深入的研究,全面的探討了單壁碳納米管導致的大鼠主動脈內(nèi)皮細胞的氧化損傷；然后,試圖以氧化損傷作為

2、出發(fā)點,研究單壁碳納米管導致的大鼠主動脈內(nèi)皮細胞凋亡的分子機制和信號通路。
　　 在單壁碳納米管所致的氧化損傷的研究中,分別從細胞水平到分子水平再到蛋白質水平來進行深入的探討,即:活性氧族(ROS)、非酶類抗氧化物谷胱甘肽(GSH)、脂質過氧化物丙二醛(MDA)、酶類抗氧化物超氧化物歧化酶(SOD)、DNA損傷DNA-蛋白質交聯(lián)以及單細胞凝膠電泳(DPC、單細胞凝膠電泳)、蛋白質損傷(蛋白質羰基化)、炎癥因子(TNFα)、抗氧化

3、蛋白(HO-1)等方面進行相對全面的研究,我們發(fā)現(xiàn),隨著單壁碳納米管暴露的劑量和時間的不斷增加,大鼠主動脈內(nèi)皮細胞內(nèi)活性氧族的含量會逐漸增加,抗氧化物(GSH、SOD)的含量會被逐漸消耗,DNA損傷(DPC、單細胞凝膠電泳)程度會逐漸加重以及蛋白質損傷(蛋白質羰基化)程度逐漸加劇,TNFα的表達逐漸增加、抗氧化蛋白的表達隨之上調。
　　 在單壁碳納米管誘導的細胞凋亡的研究中,試圖通過對不同蛋白表達的檢測明確細胞凋亡的分子機制。通

4、過大量的實驗數(shù)據(jù)和研究結果發(fā)現(xiàn)單壁碳納米管作用于大鼠主動脈內(nèi)皮細胞后,可以導致活性氧族在細胞內(nèi)的不斷積累,活性氧族的不斷堆積導致了氧化損傷的加劇最終誘發(fā)了線粒體途徑的細胞凋亡。通過熒光顯微鏡和電鏡觀察了細胞的細胞結構和亞細胞結構的變化、Caspase-3活化、NF-κB、P53、Caspase-3蛋白、BAX蛋白、AIF蛋白、細胞色素C蛋白的調控。
　　 總之,實驗結果顯示:單壁碳納米管所誘導的大鼠主動脈內(nèi)皮細胞凋亡的分子信號通