色胺酮對實驗性哮喘豚鼠體內(nèi)炎性介質(zhì)的影響.pdf

1、色胺酮（tryptanthrin，TRYP），吲哚喹啉類生物堿，最初由產(chǎn)藍(lán)植物中得到，具抗炎、抗真菌、抗腫瘤等藥理活性。研究發(fā)現(xiàn)，色胺酮可以抑制與哮喘發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的白三烯、前列腺素、NO、NOS等炎性介質(zhì)的生成，但色胺酮是否對哮喘有治療作用尚未見文獻(xiàn)報道。本課題采用多種藥理學(xué)方法，探討色胺酮對哮喘的治療作用及其作用機(jī)制。
　　1實驗?zāi)康?br>　　觀察色胺酮對哮喘的治療作用，探討其作用機(jī)制，為色胺酮治療哮喘提供理論依據(jù)。

2、r>　　2實驗方法
　　2.1復(fù)制急性哮喘動物模型并比較各組豚鼠哮喘潛伏期
　　2.1.1急性哮喘豚鼠模型復(fù)制及評價采用磷酸組胺霧化吸入法建立急性哮喘豚鼠模型；結(jié)合病理切片觀察動物行為，評價該模型是否成功復(fù)制。
　　2.1.2給藥前后潛伏期分析模型復(fù)制成功后，給藥組灌胃1w，再次激發(fā)哮喘發(fā)生，記錄并比較各組給藥前后哮喘發(fā)生潛伏時間。
　　2.2復(fù)制慢性哮喘動物模型并檢測豚鼠體內(nèi)NO、NOS、IFN-γ、IL-4水

3、平
　　2.2.1慢性哮喘豚鼠模型復(fù)制及評價采用粗卵蛋白腹腔注射法致敏，通過霧化吸入卵蛋白生理鹽水稀釋液，激發(fā)哮喘建立動物模型；結(jié)合病理切片觀察動物行為，評價該模型是否成功復(fù)制。
　　2.2.2NO、NOS、IFN-γ、IL-4水平檢測采用硝酸還原酶法測定豚鼠血清、BALF中NO含量；化學(xué)法測定豚鼠血清中NOS含量；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測豚鼠BALF中IFN-γ和IL-4水平。
　　2.3檢測慢性哮喘豚鼠肺組

4、織中NOS、COX-2水平
　　采用免疫組化染色法，對豚鼠肺組織進(jìn)行NOS、COX-2免疫組化染色，色胺酮及地塞米松干預(yù)后，觀察NOS、COX-2蛋白在豚鼠肺組織中的表達(dá)。
　　3實驗結(jié)果
　　3.1潛伏期比較色胺酮70mg/kg、35mg/kg劑量組，給藥后哮喘潛伏期（125.8s±16.3s，157.1s±23.6s）較給藥前（55.6s±7.3s，56.1s±9.5s）延遲一倍以上，與模型組（給藥前58.4s±8

5、.7s，給藥后59.4s±7.4s）對比有顯著差異（P＜0.05）；病理切片觀察：色胺酮給藥各組肺部急性輕度炎癥，模型組肺部急性中度炎癥。
　　3.2色胺酮對豚鼠體內(nèi)NO、NOS、IFN-γ、IL-4水平影響豚鼠血清中：色胺酮各劑量組及地塞米松組NO含量分別為（66.12±4.86）nmol/l、（70.85±5.32）nmol/l、（74.45±6.03）nmol/l、（65.71±6.01）nmol/l，較模型組（98.12±

6、10.12）nmol/l含量顯著降低（P＜0.05）；色胺酮各劑量組及地塞米松組NOS含量分別為（0.62±0.03）u/ml、（0.67±0.04）u/ml、（0.71±0.05）u/ml、（0.51±0.02）u/ml，較模型組（0.87±0.05）u/ml含量顯著降低（P＜0.05）。
　　豚鼠BALF中：色胺酮各劑量組及地塞米松組NO含量分別為（7.05±2.05）nmol/L、（8.44±2.33）nmol/L、（9.3

7、1±2.65）nmol/L、（6.83±1.43）nmol/L，較模型組（13.57±2.12）nmol/L含量顯著降低（P＜0.05）；色胺酮各劑量組及地塞米松組IFN-γ水平分別為（854.94±80.86）pg/ml、（739.08±54.32）pg/ml、（576.45±68.03）pg/ml、（506.71±70.01）pg/ml，較模型組（423.12±43.34）pg/ml，IFN-γ水平顯著降低（P＜0.05）；色胺酮各

8、劑量組及地塞米松組IL-4水平分別為（9.05±2.39）ng/l、（13.14±2.19）ng/l、（19.31±1.45）ng/l、（15.63±1.76）ng/l，較模型組（43.66±2.27）ng/l水平顯著升高（P＜0.05）。
　　3.3色胺酮對豚鼠肺組織中NOS、COX-2蛋白表達(dá)影響豚鼠肺組織檢測中：各干預(yù)組及模型組NOS蛋白表達(dá)陰性；空白組及地塞米松組COX-2蛋白表達(dá)陰性，色胺酮各組及模型組COX-2表達(dá)陽性