抗癲癇藥對(duì)大鼠早期腦發(fā)育與認(rèn)知功能的影響及其可能機(jī)制.pdf

1、【目的】研究AEDs對(duì)不同腦發(fā)育期大鼠認(rèn)知功能的影響，初步探討AEDs損害認(rèn)知功能的可能機(jī)制。 【方法】以生后第8天(Posmatal day 8，P8)及P15幼年Wistar鼠為研究對(duì)象，分組予苯巴比妥(Phenobarbital，PB)(30mg/kg，qd)、丙戊酸鈉(Valproate sodium，VPA)(150mg/kg，bid)、托吡酯(Topiramate，TPM)(40mg/kg，bid)連續(xù)灌胃用藥7天，

2、對(duì)照組服用羧甲基纖維素鈉(Carboxymethylcellulose，CMC)代替。給藥結(jié)束后將各組動(dòng)物分為兩部分，其中一半取血測(cè)定PB、VPA血藥濃度、測(cè)量腦重，并用TUNEL染色法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況，電鏡觀察海馬突觸形態(tài)。免疫組化法檢測(cè)突觸素(Synaptophysin，SYP)及腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表達(dá)的變化。另一半實(shí)驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)喂養(yǎng)，并分別于給藥結(jié)

3、束后第7天及P60齡時(shí)予Morris水迷宮檢測(cè)其學(xué)習(xí)記憶與空間定位能力，于實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)(P65)處死動(dòng)物，檢測(cè)腦組織內(nèi)SYP的表達(dá)。 【結(jié)果】(1)與同期實(shí)驗(yàn)對(duì)照組比，生后8天使用PB、VPA后，大鼠顳葉皮層及海馬CA3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡發(fā)生率顯著升高(p<0.01)，大鼠腦重量減低(p<0.01)；海馬CA3區(qū)突觸素積分光密度(Integratedoptical density，IOD)顯著降低(p<0.01)，且顳葉皮層及海馬CA

4、3區(qū)神經(jīng)細(xì)胞BDNF IOD顯著降低(p<0.01)。電鏡下，突觸前膜囊泡數(shù)量減少，突觸間隙增寬。Morris水迷宮檢測(cè)，大鼠尋臺(tái)逃避潛伏期較對(duì)照組顯著延長(zhǎng)(p<0.01)，穿越平臺(tái)次數(shù)較對(duì)照組顯著減少(p<0.01)。隨訪至生后65天(P65)時(shí)，實(shí)驗(yàn)組大鼠腦重和海馬CA3區(qū)突觸素IOD仍顯著低于對(duì)照組(p<0.05)。(2)生后15天服用PB、VPA的大鼠，無論其顳葉皮層及海馬CA3區(qū)凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量、腦重，還是海馬CA3區(qū)突觸素I

5、OD、顳葉皮層及海馬CA3區(qū)BDNF IOD與對(duì)照組相比均無顯著性差異，電鏡觀察突觸無明顯形態(tài)學(xué)改變。大鼠尋臺(tái)逃避潛伏期及穿越平臺(tái)次數(shù)與對(duì)照組比較也無顯著差異。(3)無論是生后8天，還是15天服用TPM，與對(duì)照組相比，大鼠的顳葉皮層及海馬CA3區(qū)凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量、腦重、海馬CA3區(qū)突觸素IOD、顳葉皮層及海馬CA3區(qū)BDNF IOD均無顯著性差異，電鏡觀察突觸無明顯形態(tài)學(xué)改變。大鼠尋臺(tái)逃避潛伏期及穿越平臺(tái)次數(shù)與對(duì)照組比較也無顯著差異。

6、 【結(jié)論】(1)在腦快速生長(zhǎng)發(fā)育期PB、VPA能夠促進(jìn)海馬及顳葉皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，海馬突觸生長(zhǎng)不良，減低大鼠腦重，造成認(rèn)知功能損傷。而此種腦形態(tài)與功能的損害，呈現(xiàn)不可逆性。(2)PB、VPA對(duì)大鼠腦發(fā)育及認(rèn)知功能損害存在敏感期，腦快速生長(zhǎng)期后，服用PB、VPA未發(fā)現(xiàn)對(duì)大鼠腦發(fā)育及功能存在明顯影響。(3)TPM對(duì)快速生長(zhǎng)期大腦未產(chǎn)生明顯結(jié)構(gòu)與功能異常，可以成為小年齡癲癇治療的適當(dāng)用藥。(4)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)：BDNF表達(dá)的變化及其影響的突