睪丸扭轉(zhuǎn)后對(duì)側(cè)睪丸細(xì)胞凋亡與Fas-FasL及遲發(fā)型超敏反應(yīng)（DTH）的研究.pdf

1、目的：研究睪丸扭轉(zhuǎn)后對(duì)對(duì)側(cè)睪丸的影響與細(xì)胞凋亡及機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)睪丸自身抗原的應(yīng)答的關(guān)系。 方法：通過(guò)建立大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)模型，設(shè)立假手術(shù)組、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位切除組和睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+口服CsA組。于手術(shù)后2周、4周分別采用HE染色、脫氧核搪核酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP的缺口末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)對(duì)對(duì)側(cè)睪丸的組織病理學(xué)和細(xì)胞凋亡進(jìn)行觀察；采用免疫組化和實(shí)時(shí)螢光定量PCR對(duì)Fas-FasL的蛋白表達(dá)和mRNA水平進(jìn)行檢測(cè)；使

2、用游標(biāo)卡尺測(cè)量睪丸扭轉(zhuǎn)后對(duì)睪丸自身抗原的足墊反應(yīng)。 結(jié)果：1)手術(shù)后4周睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組和睪丸扭轉(zhuǎn)后切除組的對(duì)側(cè)睪丸出現(xiàn)曲細(xì)精管的生精上皮排列紊亂、脫落，生精上皮細(xì)胞層數(shù)減少；睪丸扭轉(zhuǎn)后給予CsA組的對(duì)側(cè)睪丸的上述病理改變明顯減輕。 2)TUNEL顯示，睪丸扭轉(zhuǎn)2周、4周，睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組和睪丸扭轉(zhuǎn)后切除組的對(duì)側(cè)睪丸可見(jiàn)大量的凋亡細(xì)胞，睪丸扭轉(zhuǎn)后給予CsA組的對(duì)側(cè)睪丸的凋亡細(xì)胞數(shù)明顯比上述兩組少。 3)免疫組化示，睪

3、丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組和睪丸扭轉(zhuǎn)后切除組的對(duì)側(cè)睪丸的Fas蛋白和FasL蛋白的表達(dá)升高，睪丸扭轉(zhuǎn)后給予CsA組的對(duì)側(cè)睪丸Fas蛋白和FasL蛋白表達(dá)水平未見(jiàn)顯著變化。 4)實(shí)時(shí)螢光定量PCR顯示，睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組和睪丸扭轉(zhuǎn)后切除組的對(duì)側(cè)睪丸的Fas-FasLmRNA水平升高，而睪丸扭轉(zhuǎn)后給予CsA組的Fas-FasLmRNA水平末見(jiàn)顯著變化。 5)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組和睪丸扭轉(zhuǎn)后切除組出現(xiàn)明顯足墊反應(yīng)，而睪丸扭轉(zhuǎn)后給予CsA組的足墊反應(yīng)明

4、顯受到抑制。 結(jié)論：1睪丸扭轉(zhuǎn)后出現(xiàn)對(duì)側(cè)睪丸生殖細(xì)胞大量凋亡，同時(shí)睪丸生殖細(xì)胞凋亡的出現(xiàn)和Fas-FasL表達(dá)的升高同步，提示了睪丸扭轉(zhuǎn)后機(jī)體通過(guò)Fas-FasL調(diào)控對(duì)側(cè)睪丸生殖細(xì)胞凋亡。 2睪丸扭轉(zhuǎn)后激發(fā)機(jī)體對(duì)自身睪丸抗原產(chǎn)生DTH，表明睪丸扭轉(zhuǎn)后免疫系統(tǒng)對(duì)自身睪丸抗原致敏。 3睪丸扭轉(zhuǎn)后免疫系統(tǒng)對(duì)自身睪丸抗原致敏后，可能通過(guò)細(xì)胞因子等激發(fā)FasL的表達(dá)升高，從而維持睪丸的免疫豁免，但同時(shí)Fas-FasL的表達(dá)