ΔNp63在小鼠子宮內(nèi)膜的表達及在胚泡著床過程中作用的初步研究.pdf

1、胚泡著床是人類和哺乳動物生殖過程中的重要環(huán)節(jié)，也是決定妊娠成功與否的關(guān)鍵，然而其機制尚未完全明了。在“窗口期"胚泡著床涉及胚胎與母體子宮間極其復雜而精細的多因素的協(xié)同作用。研究發(fā)現(xiàn)，在這一過程中各類調(diào)控因子有著特異的時空表達，它們誘發(fā)了著床過程的各個階段，已成為胚泡著床的分子標記。 大量研究顯示，胚泡著床和腫瘤轉(zhuǎn)移在細胞的遷移、侵入等方面非常相似。從發(fā)生學的角度看，胚胎發(fā)育和腫瘤發(fā)生在細胞的增殖、生長和分化等方面有許多共同特點，

2、尤其是它們都具有驚人的分裂能力及受原癌基因調(diào)控。 截斷型p63(△№63)是p53基因家族成員之一，表達于子宮、胎盤、唾液腺、腎臟、前列腺、皮膚、胸腺等組織。已經(jīng)肯定的是△Np63以顯性失活的方式抑制依賴TAp63和p53的靶基因的轉(zhuǎn)錄而起到癌基因的功能，有利于腫瘤的發(fā)生發(fā)展。然而△Np63在小鼠動情周期及妊娠早期中的表達情況及其對胚胎著床的影響國內(nèi)外仍無文獻報道。 目的： 本課題旨在通過研究△Np63在小鼠子宮

3、內(nèi)膜表達的規(guī)律性變化及其對胚泡植入的影響，來初步探討它在小鼠生殖中的作用。 方法： 1．收集動情周期各期和早孕2、3、4、5天小鼠子宮內(nèi)膜，共8組，每組10只小鼠。①運用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)測定△Np63mRNA的表達；②免疫組織化學SP法檢測小鼠子宮內(nèi)膜中△Np63蛋白的表達情況； 2．于孕4天小鼠子宮角注射抗△Np63的單克隆抗體，孕8天觀察著床率，分析△Np63對小鼠胚泡著床的影響。

4、 結(jié)果： 1.RT-PCR：動情前期△Np63mRNA表達明顯；動情間期和動情期表達減弱；動情后期未檢測到其表達；△Np63mRNA在早孕小鼠子宮內(nèi)膜表達顯著，孕5天達最高。 2．免疫組織化學：△Np63蛋白在間質(zhì)細胞胞漿表達；△Np63蛋白的表達規(guī)律基本上與mRNA水平的表達規(guī)律相似。 3．于孕4天子宮角注射抗△Np63單克隆抗體，觀察結(jié)果顯示注射抗體2u1×200ug／ml組，胚泡著床率由對照組的75