Let-7b及其靶基因編碼蛋白在橋本氏病伴發(fā)甲狀腺乳頭狀癌中的作用.pdf

1、目前為止，許多研究發(fā)現(xiàn)橋本氏甲狀腺炎患者發(fā)生甲狀腺乳頭狀癌危險(xiǎn)性較正常人群明顯增高，免疫以及炎癥反應(yīng)被發(fā)現(xiàn)在其中扮演著一定的作用，但是基因以及蛋白層面上的具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步深入研究。Let-7b為miRNAs其中Let-7家族中的一員，已經(jīng)被許多研究發(fā)現(xiàn)與腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，且其在免疫及炎癥反應(yīng)中的作用也被許多文獻(xiàn)報(bào)道，但是其在甲狀腺乳頭狀癌合并橋本氏甲狀腺炎的發(fā)生中的作用仍未有研究報(bào)導(dǎo)，本課題即針對(duì)此方面進(jìn)行深入研究探

2、討。
　　目的：檢測(cè)Let-7b及其靶基因編碼蛋白在HT合并PTC患者、單純PTC患者及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者組織中的表達(dá)，并探討這些因子對(duì)HT伴發(fā)PTC的影響
　　方法：收集HT合并PTC患者、單純PTC患者及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者的新鮮組織并從中提取microRNAs。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)PTC合并HT患者、單純PTC患者癌組織以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者病變組織中Let-7b的表達(dá)水平，并應(yīng)用western blot技術(shù)對(duì)

3、其中的CCR7、CCL7水平進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)一步應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)CCR7、CCL7及PTAFR在單純HT患者、HT合并PTC、單純PTC以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者組織中的表達(dá)情況。收集所有檢測(cè)標(biāo)本的甲狀腺功能指標(biāo)以及病理結(jié)果。應(yīng)用單因素方差分析方法比較Let-7b、CCR7、CCL7、PTAFR在三組組織中的表達(dá)，應(yīng)用相關(guān)分析方法探索組織中Let-7b、CCR7、CCL7、PTAFR的表達(dá)與患者臨床指標(biāo)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：①L

4、et-7b在HT合并PTC患者以及單純PTC患者中表達(dá)較結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者表達(dá)明顯下調(diào)，經(jīng)計(jì)算ΔΔCt=ΔCtPTC組-ΔCt結(jié)甲組=1.25，ΔΔCt=ΔCtPTC合并HT組-ΔCt結(jié)甲組=2.02，提示PTC組的組織中Let-7b基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)估值為結(jié)甲組的2-ΔΔCt=0.61倍，PTC合并HT組的組織中Let-7b基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)估值為結(jié)甲組的2-ΔΔCt=0.38倍。Let-7b在HT合并PTC患者中表達(dá)較單純PTC患者表達(dá)也下調(diào)，

5、ΔΔCt=ΔCtPTC合并HT組-ΔCtPTC組=0.77，提示PTC合并HT組的組織中Let-7b基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)估值為單純PTC組的2-ΔΔCt=0.62倍，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②CCR7主要表達(dá)于細(xì)胞的胞漿以及胞膜，其在HT合并PTC患者、單純PTC患者以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫者中的表達(dá)量逐漸遞減。其表達(dá)量與患者的FT3有關(guān)（r=0.399，P＜0.05）。③CCL7也主要表達(dá)于細(xì)胞的胞漿以及胞膜，在HT合并PTC患者、單純PTC患者以及結(jié)

6、節(jié)性甲狀腺腫者中的表達(dá)量也逐漸遞減。其表達(dá)量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（r=0.573，P＜0.01）④PTAFR也主要表達(dá)于細(xì)胞的胞漿以及胞膜，其在腫瘤組織、單純HT患者病理組織以及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫者病理組織中的表達(dá)量逐漸遞減，其在PTC合并HT組織中的表達(dá)較在單純PTC組織中的表達(dá)陽性率相當(dāng)，但著色強(qiáng)度弱。
　　結(jié)論：Let-7b的低表達(dá)在HT合并PTC的發(fā)病過程中發(fā)揮一定的促進(jìn)作用，并且此作用可能是通過調(diào)控靶基因編碼蛋白CCR7、CCL