清膽補(bǔ)腎湯對(duì)肝內(nèi)膽汁淤積孕鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用以清熱利濕、滋陰補(bǔ)腎為立法的清膽補(bǔ)腎湯研究對(duì)肝內(nèi)膽汁淤積孕鼠血清影響、肝臟病理結(jié)構(gòu)變化及肝臟ICAM-1mRNA在不同部位的表達(dá)的影響。 方法：動(dòng)物及分組：成年Wister雌性大鼠60只，清潔級(jí)，體重200-250g，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后，與雄性大鼠2：1合籠，每日觀察陰栓脫落，陰栓脫落日定為妊娠第1日，一直飼養(yǎng)到妊娠第12日待用。60只孕鼠隨機(jī)分為6組(每組10只)，空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、清膽補(bǔ)腎方高劑量組、清膽

2、補(bǔ)腎湯中劑量組、清膽補(bǔ)腎湯低劑量組、西藥組。造模及給藥方法：除空白對(duì)照組肌肉注射生理鹽水(2.5mg/kg-1·d-1)外，其余各組于妊娠第12日起肌肉注射EE，劑量為2.5mg/kg-1·d-1(EE溶于丙二醇中)，連續(xù)5天，清膽補(bǔ)腎湯高、中、低劑量組及西藥組于妊娠第17日給予100％、50％、25％清膽補(bǔ)腎湯，地塞米松按0.1mg/100g體重皮下注射，每只1次，1日1次。取材及檢測(cè)方法：分娩第1天眶靜脈采全血3ml，室溫下自凝20

3、min后，離心沉淀10min，離心速度為3000r/min，操作按試劑盒說明進(jìn)行。由湖北省中醫(yī)院檢驗(yàn)科完成。斷頭法處死大鼠，分離肝膽管，灌流，處理肝組織，離心，震蕩，加入ICAM-1熒光抗體；取出肝臟組織置于10％甲醛內(nèi)，固定24h以上，56℃石蠟包埋，HE染色，觀察光鏡下肝臟組織學(xué)改變。統(tǒng)計(jì)方法：均t檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1模型對(duì)照組孕鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、TBA均明顯高于正常對(duì)照組(p＜0.01)，清膽補(bǔ)

4、腎湯高、中劑量組與空白對(duì)照組血清各項(xiàng)指標(biāo)均無差異(p＞0.05)，空白對(duì)照組與清膽補(bǔ)腎湯低劑量組除DBIL外(p＞0.05)各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性差異(p＜0.01，p＜0.05)，模型對(duì)照組與清膽補(bǔ)腎湯高、中、低劑量組除TBIL、DBIL外各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著性差異(p＜0.01)，西藥組與清膽補(bǔ)腎湯中劑量組除ALT外(p＜0.05)，清膽補(bǔ)腎湯中劑量組血清AST、ALT值明顯低于西藥組(p＜0.01)，其余各項(xiàng)指標(biāo)均無差異(p＞0.05)。

5、 2空白對(duì)照組肝臟無明顯形態(tài)改變，模型對(duì)照組孕鼠肝臟病理結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)部分毛細(xì)血管內(nèi)有膽栓形成，清膽補(bǔ)腎湯高、中劑量組孕鼠肝臟病理結(jié)構(gòu)肝小葉結(jié)構(gòu)完整，未見膽汁樣物質(zhì)沉積，清膽補(bǔ)腎湯低劑量組及西藥組肝臟病理結(jié)構(gòu)見肝竇附近少許肝細(xì)胞水腫，未見膽汁樣物質(zhì)沉積。 3ICAM-1在模型對(duì)照組肝細(xì)胞、膽管內(nèi)皮細(xì)胞、門靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)明顯高于空白對(duì)照組及清膽補(bǔ)腎湯中劑量組(P＜0.01)；ICAM-1在空白對(duì)照組肝細(xì)胞、膽管內(nèi)皮細(xì)胞、門

6、靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)與清膽補(bǔ)腎湯中劑量組及西藥組有明顯差異(P＜0.01)；)ICAM-1在西藥對(duì)照組肝細(xì)胞、門靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)與清膽補(bǔ)腎湯中劑量組有明顯差異(P＜0.01)，在膽管內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)與清膽補(bǔ)腎湯中劑量組無差異(P＞0.05)。 結(jié)論：為了探討清膽補(bǔ)腎湯治療妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的可能作用機(jī)制，我們?cè)O(shè)計(jì)了本課題以探討清膽補(bǔ)腎湯對(duì)肝內(nèi)膽汁淤積孕鼠肝臟血清、病理結(jié)構(gòu)及ICAM-1的表達(dá)的影響，以為其臨床提供堅(jiān)實(shí)的理論