農(nóng)藥脅迫對(duì)擬環(huán)紋豹蛛等位酶的影響.pdf

1、本文首次報(bào)道了長(zhǎng)期農(nóng)藥脅迫對(duì)農(nóng)田狼蛛優(yōu)勢(shì)類(lèi)群體內(nèi)過(guò)氧化物酶(POD)和酯酶(EST)等位酶的影響，并且改進(jìn)了在室溫低于10℃的條件下蜘蛛類(lèi)的POD酶聯(lián)苯胺染色的實(shí)驗(yàn)方法，在60℃水浴中染色著色效果明顯改善，這一發(fā)現(xiàn)為今后同類(lèi)研究開(kāi)啟了思路，提供了條件。本文就此做了以下幾個(gè)方面的研究： (一) 應(yīng)用聚丙烯酰胺凝膠垂直板型電泳技術(shù)，對(duì)稻田中四種蜘蛛：擬環(huán)紋豹蛛(Pardosapseudoannulata)、溝渠豹蛛(Pardosa

2、laura)、武昌獾蛛(Trochosa wuchangensis)和白跗狡蛛(Dolomedes pallitarsis)的過(guò)氧化物酶(POD)和酯酶(EST)等位酶進(jìn)行了比較研究，結(jié)果表明：四種蜘蛛的POD和EST同工酶譜帶清晰，種間差異較明顯(P<0.05)，同一生境下POD酶和EST酶種內(nèi)穩(wěn)定性好。 (二)重點(diǎn)探討了長(zhǎng)期農(nóng)藥脅迫對(duì)稻田狼蛛優(yōu)勢(shì)種擬環(huán)紋豹蛛自然種群體內(nèi)的POD和EST兩類(lèi)酶的影響：應(yīng)用電泳分離技術(shù)，比較了施

3、藥(以甲胺磷等有機(jī)磷農(nóng)藥為主)稻區(qū)的雷鋒鎮(zhèn)擬環(huán)紋豹蛛種群與未施藥的天項(xiàng)鄉(xiāng)擬環(huán)紋豹蛛種群的POD和EST同工酶酶譜后，發(fā)現(xiàn)在農(nóng)藥脅迫下擬環(huán)紋豹蛛POD酶和EST酶有明顯的變化。施藥的擬環(huán)紋豹蛛種群的酶帶類(lèi)型明顯多于未施藥的種群：POD酶共有遷移率(Rf)不同的5個(gè)等位酶位點(diǎn)，Rf=269、Rf=33、Rf=122和Rf=170四條酶帶是未施藥種群所沒(méi)有的，施藥種群POD酶的多態(tài)性明顯增強(qiáng)。EST酶出現(xiàn)的Rf值區(qū)不同的8種酶帶，其中EST1

4、 (Rf=30)、EST4(Rf=215～232)、EST6(Rf=332～345)和EST7(Rf=336～375)等遷移率區(qū)的酶帶僅見(jiàn)于施藥區(qū)的雷鋒鎮(zhèn)種群，在未施藥區(qū)天頂鄉(xiāng)種群中尚沒(méi)有發(fā)現(xiàn)；并且施藥區(qū)雷鋒鎮(zhèn)種群酶帶濃度均顯著高于未施藥的天項(xiàng)鄉(xiāng)種群。 同時(shí)，為了驗(yàn)證POD同工酶的活性，本文又應(yīng)用分光光度法測(cè)定了在最大吸收波長(zhǎng)385nm條件下測(cè)得，施藥的雷鋒鎮(zhèn)種群POD酶的總活力為1.589，而未施藥的天項(xiàng)鄉(xiāng)種群的為1.056，

5、雷鋒鎮(zhèn)種群的活力顯著大于天頂鄉(xiāng)種群，這一結(jié)果初步證明了農(nóng)藥長(zhǎng)期作用致使擬環(huán)紋豹蛛的POD酶活性增大。 上述差異為什么會(huì)出現(xiàn)在同一地理?xiàng)l件下的自然種群內(nèi)，作者認(rèn)為長(zhǎng)期施用化學(xué)農(nóng)藥(有機(jī)磷)是造成這一結(jié)果的主要因子，可能是擬環(huán)紋豹蛛對(duì)長(zhǎng)期農(nóng)藥脅迫產(chǎn)生了適應(yīng)性突變和遺傳分化的緣故。 (三)甲胺磷農(nóng)藥脅迫對(duì)擬環(huán)紋豹蛛實(shí)驗(yàn)種群的POD和EST等位酶的影響：在室內(nèi)用稀釋成為原液濃度0.0025倍的甲胺磷農(nóng)藥直接喂養(yǎng)擬環(huán)紋豹蛛，經(jīng)過(guò)2