活化的HLA半相合外周血干細胞治療晚期難治性實體瘤的基礎和臨床實驗研究.pdf

1、目的： 初步探討活化的HLA半相合外周血干細胞(haplo-PBSCs)在體內外的抗腫瘤活性和作用機制，評價其治療晚期難治性實體瘤的安全性和可行性，并分析影響其治療效果的相關因素，以期為晚期難治性實體瘤患者提供一條新的安全的異體免疫治療途徑。 方法： 42例晚期轉移性/化療抵抗性實體瘤患者，采用PCR－SSP法檢測供受者之間的HLA配型情況，供者為與患者HLA配型半相合的健康直系親屬。供者經10μkg·dG-CS

2、F動員3天后采集haplo-PBSCs，體外用大劑量rhIL－2培養(yǎng)4h后回輸給患者，觀察治療后患者的一般癥狀改善和影像學評價情況并隨訪；采用流式細胞儀檢測動員、活化前后的表型變化；采用半固體瓊脂糖法測定haplo-PBSCs活化前后粒單細胞集落形成能力的變化；用LDH法檢測大劑量rhIL－2短期活化前后haplo-PBSCs的非特異性殺瘤活性的變化；用ELISA法檢測患者回輸前后血清中Th1/Th2細胞因子的含量變化情況，從而全面評價

3、haplo-PBSCs在體內外的抗腫瘤活性。并且按影響因素的情況分為不同亞組，分析比較不同亞組的總緩解率、臨床獲益率、總生存期、無進展生存期、生活質量總獲益率。 結果： 42例患者，提取供者基因組DNA的純度達(1.843±0.136)，濃度為(213.7±116)ng/ul。回輸?shù)幕罨疕LA半相合haplo-PBSCs總數(shù)為(3.39±0.51)×1010。經G-CSF動員后采集的HLA半相合haplo-PBSCs與動

4、員前相比，T細胞尤其是CD4+T細胞比例顯著下降，而NK細胞比例顯著上升(P<0.05)；經大劑量rhIL-2短期活化后，活化細胞(包括CD69+和CD25+細胞)亞群比例顯著升高(P<0.05)，而且其對多種細胞系的非特異性殺瘤活性顯著增強。治療一個療程后，患者外周血中CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD16+56+(NK)細胞比例較治療前均明顯升高(P<0.05)，而CD4+CD25+(Tregs)則明顯降低(P<0.05)；

5、外周血血清中Th1類細胞因子，如TNF-α、IFN-γ含量較治療前明顯升高(P<0.01)，而抑制細胞免疫功能的TGF-β含量明顯下降(P<0.05)。42例患者接受一個療程治療后，10例生活質量改善，22例生活質量穩(wěn)定，患者生活質量總獲益率為76.2％，生活質量評分(KPS)較治療前平均提高20分(0～30分)。臨床獲益率(CR+PR+SD)為73.8％(31例)，其中臨床達到PR的7例(包括腎癌、卵巢癌各2例，肺癌、乳腺癌、結腸癌各

6、1例)，無效11例。其中，腎癌和卵巢癌的臨床獲益率分別為90.0％和81.8％，相對于其他類腫瘤類型高，在治療反應性和敏感性上可能占優(yōu)勢。全組患者的中位無進展生存期(PFS)為6.0個月，其中腎癌組、卵巢癌組、肺癌組、乳腺癌組的中位無進展生存期(PFS)分別為5.7、10.5、5.5、7.4個月。KIR不相合方向為GVH組在治療反應性和生活質量改善上較HVG(或相合)組具有一定的優(yōu)勢，兩組的總緩解率、臨床獲益率、總生存期、無進展生存期、

7、生活質量總獲益率分別為35.3％vs4.0％、94.1％vs60.0％、26.8±3.1vs17.4±3.0月、13.4±1.3vs8.0±0.9月、89.5％vs65.2％，P值均<0.05。供受者關系為母子/女治療組較父子/女治療組患者也具有明顯的治療優(yōu)勢，兩組患者的1年隨訪治療有效率、總生存期、無進展生存期、生活質量總獲益率分別為18/24vs7/18、25.1±2.7vs13.7±3.2月、12.1±1.2vs7.5±1.3月、